ЭлБиб

ïîëó÷åííûé ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèì ìåòîäîì («Sig-

ma-Aldrich Co», ÑØÀ).

Äèñïåðãèðîâàíèå êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿð-

íûõ êàòèîííûõ áåëêîâ ïðîâîäèëè ñ ïîìîùüþ ïëà-

íåòàðíîé øàðîâîé ìåëüíèöû ÐÌ 100 (Retsch, Ãåð-

ìàíèÿ). Ïðåäâàðèòåëüíî óñòàíîâëåííûå îïòèìàëü-

íûå ðåæèìû èçìåëü÷åíèÿ, îáåñïå÷èâàþùèå íàè-

áîëåå òîíêèé ïîìîë: ñêîðîñòü âðàùåíèÿ ÷àøè —

650 ìèí

-1

; ïðîäîëæèòåëüíîñòü èçìåëü÷åíèÿ —

20 ìèí. Â ïðîöåññå èçìåëü÷åíèÿ ïîääåðæèâàëè

ñòàáèëüíóþ òåìïåðàòóðó îáðàçöà äëÿ ïðåäîòâðàùå-

íèÿ òåïëîâîé äåíàòóðàöèè áåëêîâ.

Ìèêðî- è íàíîñòðóêòóðó îáðàçöîâ êîíöåíòðàòà

ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ èññëåäîâàëè ñ ïîìîùüþ òðàíñ-

ìèññèîííîãî ýëåêòðîííîãî ìèêðîñêîïà ÅÌ-410

(«Ôèëèïñ», Íèäåðëàíäû) ìåòîäîì ïðÿìîãî ìèêðî-

ñêîïèðîâàíèÿ ñ êîíòðàñòèðîâàíèåì òÿæåëûìè ìå-

òàëëàìè ïðè èíñòðóìåíòàëüíîì óâåëè÷åíèè

157 000.

Âëèÿíèå äèñïåðãèðîâàíèÿ íà ìèêðî- è íàíîñò-

ðóêòóðó îáðàçöîâ êîíöåíòðàòà ñûâîðîòî÷íûõ áåë-

êîâ èññëåäîâàëè òàêæå ñ ïîìîùüþ ñêàíèðóþùåãî

çîíäîâîãî ìèêðîñêîïà Ñîëâåð Íåêñò™ (NT-MDT,

Ðîññèÿ).

Íà ïåðâîì ýòàïå ïðîâîäèëè ýëåêòðîííî-ìèêðî-

ñêîïè÷åñêèå èññëåäîâàíèÿ ìèêðî- è íàíîñòðóêòó-

ðû êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿðíûõ êàòèîííûõ

ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ â âîäíîì ðàñòâîðå (ðèñ. 1).

Ïîëó÷åííîå èçîáðàæåíèå ïîêàçûâàåò, ÷òî â öåëîì

îáùàÿ ìèêðîñòðóêòóðà ýòîãî îáúåêòà ìîæåò áûòü

îõàðàêòåðèçîâàíà êàê ñîñòîÿùàÿ èç ÷àñòè÷íî ðàç-

âåðíóòûõ áåëêîâûõ ãëîáóë ðàçíîãî ðàçìåðà è ðàçíîé

ôîðìû, îáðàçóþùèõ ñâÿçíóþ ïðîñòðàíñòâåííóþ

ìèêðîñòðóêòóðó â êðóïíûõ àãðåãàòàõ.

Íàíî- è ìèêðîñòðóêòóðà õàðàêòåðèçóþòñÿ îòñóò-

ñòâèåì ÿâíî âûðàæåííûõ ãëîáóëÿðíûõ ñòðóêòóð-

íûõ ýëåìåíòîâ. Âìåñòå ñ òåì îòäåëüíûå ãëîáóëÿð-

íûå ýëåìåíòû ñòðóêòóðû íàáëþäàþòñÿ, íî îíè ðàç-

ëè÷íûõ ðàçìåðîâ è íå èìåþò ÷åòêî âûðàæåííîé

ôîðìû. Ðàçáðîñ ðàçìåðîâ ýòèõ ýëåìåíòîâ ñîñòàâ-

ëÿåò îò 18 äî 60 íì.

Ðàçëè÷èå â ðàçìåðàõ ñòðóêòóðíûõ ýëåìåíòîâ, à

òàêæå îáðàçîâàíèå êðóïíûõ ñâÿçíûõ àãðåãàòîâ èç

ðàçâåðíóòûõ ìàêðîìîëåêóë áåëêîâ íå ïðåäïîëàãàåò

âûñîêîé áèîäîñòóïíîñòè äàííîãî îáðàçöà. Ñ öåëüþ

óëó÷øåíèÿ ýòîãî ïîêàçàòåëÿ ïðîâîäèëè äèñïåðãèðî-

âàíèå êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿðíûõ êàòèîííûõ

áåëêîâ ñ ïîìîùüþ ïëàíåòàðíîé øàðîâîé ìåëüíèöû.

Íà ðèñ. 2 ïðåäñòàâëåíû ÀÑÌ-èçîáðàæåíèÿ ÷àñ-

òèö êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿðíûõ êàòèîííûõ

ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ ìîëîêà äî (

) è ïîñëå (

) èç-

ìåëü÷åíèÿ íà øàðîâîé ìåëüíèöå. Ïîëó÷åííûå ðå-

çóëüòàòû íàãëÿäíî èëëþñòðèðóþò óìåíüøåíèå ðàç-

ìåðà ÷àñòèö ïîñëå èçìåëü÷åíèÿ êîíöåíòðàòà íèçêî-

ìîëåêóëÿðíûõ ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ.

Ñëåäóþùèì ýòàïîì áûëî èññëåäîâàíèå îñîáåí-

íîñòåé ìèêðî- è íàíîñòðóêòóðû êîíöåíòðàòà íèç-

êîìîëåêóëÿðíûõ ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ ïîñëå èç-

ìåëü÷åíèÿ ñ ïîìîùüþ ïðîñâå÷èâàþùåãî ýëåêòðîí-

ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 6, 2013

Ðèñ. 1. Ñòðóêòóðà êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿðíûõ êàòè-

îííûõ ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ â âîäíîì ðàñòâîðå

Ðèñ. 2. ×àñòèöû êîíöåíòðàòà íèçêîìîëåêóëÿðíûõ êàòèîí-

íûõ ñûâîðîòî÷íûõ áåëêîâ äî èçìåëü÷åíèÿ (à) è ïîñëå èçìåëü-

÷åíèÿ (á)

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека