2
•
2014
ПИВО
и
НАПИТКИ
47
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ НАПИТКИ для ОПТИМАЛЬНОГО ПИТАНИЯ
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ НАПИТКИ для ОПТИМАЛЬНОГО ПИТАНИЯ
(UV254, UV 366); подвижная фаза, ре-
комендованная Государственной фар-
макопеей11-гоиздания [8], илиподвиж-
ная фаза, рекомендованная Editedby
для ТСХ-анализов соответствующих
групп природных соединений [9]; про-
явитель (0,5 мл анисового альдегида,
10мл ледяной уксусной кислоты, 85мл
этанола, 5 мл концентрированной сер-
ной кислоты). В результате проведен-
ныхисследованийпредпочтение отдано
системе растворителей хлороформ —
этанол (8:2), обеспечивающей наибо-
лее четкое разделение используемых
компонентов лимонника китайского.
При анализе хроматограммы в УФ-
спектре лигнаныобнаруживаются в ви-
де пятен фиолетового и желтого цвета.
Количественное определение прово-
дили на хроматографе «Цвет Яуза-04»
(с УФ- и амперометрическим детекто-
ром). Использовали хроматографиче-
скуюколонкуGemini 5 мкмС18, 110А,
250
×
4,6мм; предколонкуSecurityGuard
Gartridge (C18) Phenomenex, объем
петли — 20 мкл, скорость потока —
0,5 мл/мин, давление — 45,5±1 бар.
Подвижная фаза (ПФ) —ацетонитрил
для ВЭЖХ, абсолютизированный изо-
пропиловый спирт, ортофосфорная
кислота, бидистиллированнаявода, при-
готовленная накануне анализа. Компо-
нентыПФсмешиваливследующемобъ-
емном отношении — 35:10:1:54. Затем
проводили дегазацию.
Предварительную подготовку экс-
тракта лимонника осуществляли со-
гласно схеме, представленнойна рис. 1.
Точную навеску (200мг) экстракта
взвешивали на аналитических весах,
добавляли 10 мл ПФ, помещали в во-
дяную баню с ультразвуком (УЗ) на
30 мин и отфильтровывали через ка-
проновые микропористые мембраны
размером пор 0,2 мкм.
Настойку семян лимонника вводили
безразведения.Соклимонникаразводи-
лисПФв соотношении0,1к1мл, филь-
тровали через капроновые мембраны.
Содержание составных компонентов
(
Х
, мг/мл) определяли по формуле
SV
0
m
0
X
=————,
(1)
S
0
V
где
S
— площадь пика исследуемого
компонента испытуемого образца при
255 нм;
S
0
— площадь пика исследуе-
мого компонента стандартного образца
при 255 нм;
V
— объем вводимой про-
бы раствора испытуемого образца, мкл;
V
0
— объем вводимой пробы раствора
стандарта, мкл;
m
0
—массаисследуемо-
гокомпонента стандартногообразца, мг.
Параллельно проводили опыты при
длине волны 280 нм.
Схизандрины (лигнаны) в образце
сока лимонника имели следующее клю-
чевое время удерживания: 7,51 и 8,13
мин (длина волны 255 нм), 7,42 и 8,14
мин (длина волны 280 нм). Образец
сока лимонника отличался содержа-
нием схизандрола А, тогда как другие
специфические лигнаны, характерные
для других объектов (относительно
более липофильных), были выявлены
в следовых количествах (24,40 мин).
Для данного образца было характерно
высокое содержание антоцианидинов
и аскорбиновой кислоты (рис. 2, 3).
В образце экстракта лимонника
китайского установлен более богатый
состав схизандринов (рис. 4, 5). Вре-
мя удерживания схизантерина А со-
ставило 7,33 мин, схизандрола А —
24,36 мин,
γ
-схизандрина—34,72 мин.
Диагностическое значение имеет
время удерживания исследуемых ком-
понентов и спектральное соотношение
при данных длинах волн (табл. 1).
Количественное содержание основ-
ных компонентов сока определено
пометодувнешнего стандарта. Соответ-
ствующие вещества—антоцианидины,
аскорбиновая кислота,
γ
-схизандрин.
В лимоннике содержится около 20
схизандринов, проявляющих стимули-
рующие свойства. Однако стандартные
образцы имеются лишь на два схизан-
дрина, а именно
γ
-схизандрин и схизан-
дрин. Поэтому содержащиеся в образ-
цах схизандрины были идентифициро-
ваны в рамках методов, предложенных
И.Г. Зенкевич [10] иА.Ю. Ещенко [11].
Согласно проведенным ранее ис-
следованиям [7], в экстракте лимонни-
ка антоцианидины не обнаруживали.
Их присутствие можно рассматривать
Рис. 2.
Хроматограмма анализа 100%-ного концентрированного
сока лимонника китайского (детекция 255 нм)
Рис. 3.
Хроматограмма анализа 100%-ного концентрированного
сока лимонника китайского (детекция 280 нм)
Электронн я Научная СельскоХозяйственная Библиотека