ЭлБиб

минорные компоненты, а также некультивируемые микроорганизмы,

которые могут играть важную экологическую роль.

Сотрудниками молекулярно-генетической лаборатории ООО

«БИОТРОФ» впервые был применен комплексный подход для исследо

вания состава микроорганизмов филлосферы и силоса с использованием

современных молекулярно-генетических методов T-RFLP, NGS-

секвенирование и ПЦР в реальном времени. Изучен состав эпифитной

микрофлоры 67 образцов вегетирующих злаковых, бобовых и смешан

ных посевов кормовых культур на различных этапах возделывания и го

тового силоса из пяти районов (Гатчинский, Сланцевский, Ломоносов

ский, Кировский, Приозерский) Ленинградской области. Исследовано

содержание микрофлоры на разных этапах созревания силосов (58 об

разцов) с использованием биологических заквасок на основе бацилл и

молочнокислых бактерий и химических консервантов. Сравнивали ко

личество бактерий различных групп в силосе, заложенном с применени

ем биологических заквасок Биотроф и Биотроф-111 (33 пробы), химиче

ского консерванта (6 проб), а также без применения консервантов

(19 образцов).

С использованием метода NGS-секвенирование было показано,

что состав микробиоценоза филлосферы и силоса характеризовался дос

таточно богатым родовым разнообразием. В составе эпифитной микро

флоры было выявлено до 70 родов бактерий, в силосе — от 39 до 96 ро

дов. Помимо этого, с применением метода T-RFLP в составе микрофло

ры филлосферы в период роста было выявлено до 94 филотипов микро

организмов, в силосе в период созревания — от 13 до 104 филотипов.

Структура микробиоценоза скошенной растительной массы резко

отличалась от состава микробиоты растительного травостоя и значи

тельно менялась в процессе силосования под влиянием различных фак

торов (вид силосуемого растения, срок созревания силоса, применение и

тип консервирующих препаратов).

В составе эпифитной микрофлоры доминировали, главным обра

зом, представители филума

Proteobacteria

: бактерии семейства

Enterobacteriaceae,

рода

Pseudomonas

sp., а также порядка

Burkholderiales.

Резкое снижение уровня pH, создание низкого окислительно

восстановительного потенциала (условий, близких к анаэробным), из

менение температурных условий, содержания сухого вещества и др.

в условиях микробиоэкосистемы силоса [2, 7] приводило к кардиналь

ным сдвигам в структуре микробиоценоза. В составе микробиологиче

ского сообщества силоса в процессе созревания доминировали, в основ

ном, представители филума

Firmicutes

(до 91,5 %), в котором основную

долю составляли факультативно-анаэробные молочнокислые бактерии

243

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека