УДК 576.8:636.085.52+633.22
СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА МИКРОФЛОРЫ
СИЛОСА: НОВЫЕ ИТОГИ
Г. Ю. Лаптев,
доктор биологических наук,
Е. А. Йылдырым, кандидат биологических наук,
Л. А. Ильина,
кандидат биологических наук
ООО «БИОТРОФ+»,
г. Санкт-Петербург, Россия,
deniz@biotrof.ruБыл применен комплексный подход для исследования состава микроорганизмов
филлосферы и силоса с использованием современных молекулярно-генетических ме
тодов T-RFLP, NGS-секвенирование и ПЦР в реальном времени. Изучен состав эпи-
фитной микрофлоры 67 образцов вегетирующих злаковых, бобовых и смешанных
посевов кормовых культур на различных этапах возделывания и готового силоса из
пяти районов Ленинградской области. Исследовано содержание микрофлоры на
разных этапах созревания силосов (58 образцов) с использованием биологических
заквасок на основе бацилл и молочнокислых бактерий и химических консервантов.
Использование молекулярно-генетических методов исследования позволило выявить
в филлосфере кормовых культур значительное таксономическое разнообразие мик
роорганизмов. Состав микроорганизмов скошенной растительной массы резко от
личался от состава микробиоты растительного травостоя и значительно менялся
в процессе силосования под влиянием различных факторов. В силосе были выявлены
бактерии, традиционно считающимися типичными обитателями желудочно-
кишечного тракта млекопитающих, что не позволяло использование классических
микробиологических методов. Интродукция штаммов L. plantarum и В. subtilis в си
лосную массу приводит к уменьшению содержания представителей нежелатель
ной микрофлоры, а также патогенов. Заселение кормового травостоя микроско
пическими грибами происходит уже на стадии роста. В силосе происходит нарас
тание численности микроскопических грибов. Микотоксины были выявлены во всех
анализированных образцах травостоя и силоса. В кормовых культурах микотокси
ны присутствовали уже на начальных стадиях роста растений. В силосе происхо
дило нарастание количества одних микотоксинов при одновременном снижении
количества других в результате деятельности микроорганизмов-биодеструкторов.
Ключевые слова:
силос, T-RFLP, NGS-секвенирование, ПЦР в реальном времени,
микрофлора, микотоксины, микромицеты, L. plantarum, В. subtilis.
Российская Федерация занимает первое место в мире по объемам
производства силоса (30-40 млн т/год). Производство качественных
кормов собственной заготовки (силоса, сенажа, зерносенажа) в живот
новодческих хозяйствах имеет большое значение для сохранения здоро
вья и продуктивного долголетия крупного рогатого скота (КРС), а также
обеспечения населения молочной продукцией. В Доктрине продоволь
ственной безопасности Российской Федерации от 30.01.2010 г. в качест-
241
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека