501 / 736
бом денатурирующем воздействии глугарового альдегида и других модификато
ров на вторичную структуру белка.
Для изучения механизмов катализа свободными и иммобилизованными
ферментами незаменимыми являются кинетические методы анализа.
Кинетика реакции катализа свободной и иммобилизованной липазой не
подчиняется уравнению Михазлчса-Ментен, так как в обоих случаях имеет место
ингибирование избытком субстрата. Для определения значений кинетических па
раметров использовались расчетно-графические методы, а также разработанная в
Воронежском государственном техническом университете программа обработки
результатов с целью получения значений кинетических параметров
и
\'шх.
Иммобилизованный фермент характеризуется более низкими значениями
Ушх
и
Кга(37,04 мкмоль/мин и 1,56 моль/л) по сравнению с растворимой формой (71,42
мкмоль/мин и 3,22 моль/л).
Анализ данных, полученных методом Диксона, показывает, что имидазоль
ная группа гистидина играет ключевую роль в гидролизе липидов. Этот факт под
тверждают результаты фотоокйсления фермента в присугствии метиленовой сини.
Молекула липазы содержит 4 поверхностных SH--группы. О вкладе сульф*
тидрильных
групп в поддержание каталитически активной конформации бедка
свидетельствует частичная инактивация фермента при их блокировании.
В дальнейшем нами планируегся обсуждение возможных механизмов ката
лиза свободными и иммобилизованными липазами.
495
Научная электронная библио ека ЦНСХБ