ЭлБиб

32 / 64

30 Всё о МЯСЕ
белка), который наиболее часто
используют при производстве мяс-
ных изделий.
Приготовленные растворы ка-
либровочной кривой вносили
в хромогенную смесь экспресс
тест-пробирки и выдерживали при
комнатной температуре 10 минут,
в течение которых была произве-
дена оценка реакции, фото данных
пробирок представлены на ри-
сунке 1.
Следует отметить, что пик ре-
акции наблюдается на пятой ми-
нуте реакции, а после десятой ми-
нуты могут развиваться неспеци-
фические реакции и учитывать ре-
зультаты по истечению 10 минут
уже не целесообразно.
Как видно из результатов, спе-
цифическая реакция, которая вы-
ражается в изменении окраски от
салатового (бледно-зеленого) до
оттенков фиолетового цвета, на-
блюдалась в тестах с содержанием
БСА 1×10-4г уже через 1 минуту и
1×10-5г — через 10 минут. В тесте
с содержанием БСА 1×10-6г спе-
цифической реакции не было.
Данные по соевому белку по-
казывают, что при внесении рас-
твора с содержанием сои 1×10-3г и
1×10-4г тест показывал стабильный
результат и на 1 и на 10 минуте, в
тест-пробирке с соей 1×10-5 реак-
ции не было.
Таким образом, по изменению
окраски растворов можно судить
о наличии на испытуемой поверх-
ности белковых загрязнений, даже
в таких, на первый взгляд, малых
количествах как 1×10-5г по живот-
ному белку и 1×10-4г — по расти-
тельному.
Для сопоставления чувстви-
тельности разработанной тест си-
стемы с методом на основе ПЦР
на рисунке 2 представлен результат
амплификации в режиме реаль-
ного времени образца ДНК, выде-
ленной из стандартного раствора
сои 1×10 -3 и ее разведения.
Как видно из рисунка, специ-
фическая реакция амплификации
наблюдалась во всех испытуемых
образцах, т.е. чувствительность
ПЦР в 10 раз выше, чем у разра-
ботанной нами тест-системы.
Такимобразом, применение тес-
та на остаточные белковые загряз-
нения позволяет оценить не толь-
ко эффективность санитарной об-
работки, но также позволяет оце-
нить количество остаточных бел-
ковых загрязнений и использовать
тест-систему при мониторинге конт-
рольных точек на предприятии.
№ БСА, г № Соя, г
1 1 ×10-4 4 1×10-3
2 1 ×10-5 5 1×10-4
3 1 ×10-6 6 1×10-5
Таблица 1. Калибровочная кривая для определения LOD
Рис.1. Изменения окраски хромогенной смеси тест-
пробирок после внесения стандартных растворов.
Рис.2. Кривые флюоресценции накопления ПЦР продуктов в ходе амплификации
в реальном времени ДНК стандартного образца сои в разведениях. 1 – положи-
тельный контрольный образец сои, 2 –стандартный образец сои 1×10-3, 3 – 1×10-4,
3 – 1×10-5.
Литература
1. Purkrtová S., Turoñová N., Pilchová T. Re-
sistance of Listeria monocytogenes Biofilms
to Disinfectants. // Czech J. Food Sci. Vol.
28, 2010, №. 4: 326-332
2. Минаев М.Ю., Фомина Т.А. Экспресс-тест-
система для определения остаточных
белковых загрязнений // Пищевая про-
мышленность. – 10/2011- ст.-34-35.
3. Опарин П.С., Тюрнева Н.А. Дезинфекто-
логия на современном этапе// ВС НЦ СО
РАМН – Иркутск, 2003
Применение теста на остаточные белковые загрязнения позволяет
оценить не только эффективность санитарной обработки, но также
позволяет оценить количество остаточных белковых загрязнений
и использовать тест-систему при мониторинге контрольных точек
на предприятии.
→│
ИССЛЕДОВАНИЯ / Безопасность
№ 6 декабрь 2011
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека