НАУКА — ПРОИЗВОДСТВУ
2
•
2004
ПИВО
и
НАПИТКИ
По другому способу ферментации све
жие листья помещают в закрытый сосуд,
где они находятся до тех пор, пока не увя
нут, после чего их запаривают без воды до
почернения и высушивают на воздухе.
Применяемый в годы Второй мировой
войны способ приготовления чая из лис
тьев ежевики предусматривал 6 часовое
завяливание свежихлистьев, перетирание
завяленных листьев и ферментацию их в
течение 5–7 ч или двухстадийное томле
ние —сначала при температуре 70...80 °С
в течение 1 ч, а затем на слабом огне в те
чение 30 мин.
После этого следовала сушка в печах
или духовках в течение 5–6 ч при темпе
ратуре 100 °С. Об эффективностифермен
тации листьев ежевики существуют про
тиворечивыемнения. По утверждениюне
которых авторов, ферментация ежевич
ных листьев не оправдана, так как следу
ет всячески стремиться к тому, чтобы со
хранить в растениикакможнобольше дей
ствующих веществ, избегая всякой обра
ботки, способствующей полной или час
тичной утрате витаминов, фитонцидов и
других ценных веществ.
По немецкому способу части ежевич
ного куста (листья, стебли, усики) измель
чают и обрабатывают во влажном состоя
нии при повышенной температуре в тече
ние времени, пока сырье не примет корич
невый цвет, после чего влагу отбирают и
на листья воздействуют аммиаком до при
обретения им темного цвета. Далее массу
высушивают, в процессе чего отделяется
аммиак.
Сцельюболее детального изучения вы
шеуказанных вопросов были проведены
широкие исследования для установления
химического состава ежевичного листа и
разработки оптимальных параметров его
переработки на фиточайные продукты.
Опыты проводили в 1984–1987 гг. на
сезонном разрезе вегетации ежевично
го листа. Для исследования использова
ли 6 листные побеги
R.caesius
.
При выполнении работы устанавлива
ли массу составных частей побега по сле
дующей методике: 100 побегов ежевики
разделяли на отдельные листья и стебель,
определяли общуюмассу отдельныхфрак
ций и далее вычисляли массу отдельных
элементов.
Определения проводили в 16 кратной
повторности. Определяли также влаж
ность, содержание экстрактивных ве
ществ ифенольных соединений. Получен
ные результаты показаны в табл. 1.
Из полученных результатов можно де
лать вывод, что трехлистный побег еже
вичного листа по массе почти в 2 раза пре
восходит чайного, при этом в 6 листном
побеге масса стебля доходит да 50 % от
общей массы.
Было установлено, что сравнительно
высокая влажность —у второго и третьего
листа, низкая — у почки и первого листа.
По динамике влажностисоставных эле
ментов ежевичный побег существенно от
личается от чайного.
Низкое содержание влажности в поч
ке ежевичного листа объясняется биоло
гической рольюпоследней, так как она не
посредственно связана с образованием
плода, поэтому в ней энергично накапли
ваются питательные вещества, необходи
мые для роста плодов.
Ежевичный лист характеризуется дос
таточнымсодержаниемэкстрактивных ве
ществ. Самое высокое содержание экст
рактивных веществ отмечается в стебле,
что хорошо согласуется с отмеченной за
кономерностью в чайном листе, но в от
личие от чая почка и первый лист ежеви
ки выделяются самой низкой экстрактив
ностью.
В ежевичном листе было установлено
высокое содержание фенольных соедине
ний, которых по абсолютной величине
больше, чем в чайном листе.
Характер накопления фенольных ве
ществ по отдельным частям ежевичного
побега аналогичен динамике содержания
водорастворимых экстрактивных ве
ществ: самое низкое содержание в стеб
ле, далее идут почка, первый и шестой
лист. Былаизучена сезонная динамика вы
шеотмеченных веществ в период вегета
ции ежевичного побега (рис. 1).
Низкая влажность ежевичного побега
регистрируется в начале и конце вегета
ции. В общей картине отмеченная дина
мика идентична динамике распределения
влаги в трехлистном чайном побеге по ме
сяцам с той разницей, что максимум со
держания ее в чайном листе в большин
стве случаев приходится на август. Дан
ной динамикой влажности объясняется
характер изменения экстрактивных ве
ществ и фенольных соединений.
В дальнейшем изучали качественный
состав фенольных соединений ежевично
го листа.
Известно, что из многочисленных
групп природных фенольных соединений
наиболее важныфлавоноиды (антоцианы,
флавоны, катехины, флавонолыи др.)При
этом они самые широко распространен
ные в природе фенольные соединения.
Цельнашейработысостоялавизучении
качественного состава катехинов и лейко
антоцианов, так как именно эти группы
флавоноидов характеризуются наиболее
высокой биологической активностью.
При выполнении экспериментов полу
чали суммарный препарат флавоноидов из
листьев ежевики по следующей методике:
свежие листья в количестве 500 г измель
чали и пятикратно экстрагировали в кол
бе с обратнымхолодильникомна кипящей
водяной бане 80% нымэтанолом (продол
жительность каждой экстракции 40–
60 мин). Экстракты объединяли, фильтро
вали и упаривали под вакуумом при
50...60 °С до удаления этанола. Водный ос
таток многократно обрабатывали хлоро
формом для удаления хлорофилла, смол и
других растворимых примесей. Далеефла
воноиды экстрагировали этилацетатом,
объединяли и упаривали под вакуумом до
суха, до получения аморфной массы.
Сцельюизучения качественного соста
ва суммарный препаратфлавоноидных ве
ществфракционировали на колонке поли
амидного сорбента. Для этого 15 г препа
ратарастворялив дистиллированнойводе,
добавляли полиамидный сорбент до полу
чения густой массы. Смесь вносили в ко
лонку (115±4см) с полиамидным сорбен
том в соотношении 1:20. Элюирование
проводили сначала дистиллированной во
дой, а затем водным этанолом различной
концентрации (30, 50 и 70 %). Фракции
отбирали по 30 мл.
Контроль процесса элюции для катехи
нов и лейкоантоцианидов осуществляли
ванильным реактивом, а фенолов — ульт
рафиолетовымсветомиAlCl
3
. Элюатыана
лизировали методом двумерной хромато
графии на бумаге с системами растворите
лей — 15% ной уксусной кислоты с про
явителем: ванилиновым реактивом (1%
ный ванилин в концентрированной соля
ной кислоте, 1% ный раствор бензоводно
го хлористого алюминия в этаноле и 3%
ный раствор
n
толуолсульфокислотыв эта
ноле).
После разделения суммарногопрепара
тафлавоноидных веществ были получены
три фракции, двумерные хроматограммы
которых даны на рис. 2.
Фракцию I из колонки элюировали
50% ным этанолом. Она состоит из пяти
веществ (табл. 2), два из которых окраши
ваются ванилиновым реактивом в крас
ный цвет и, вероятно, относятся к катехи
нам. Остальные три после обработки их
растворомAlCl
3
имеют зеленуюижелтую
флуоресценцию в УФ свете и, следова
тельно, принадлежат к флавонолам.
Фракцию II из колонки элюировали
60% ным этанолом. Она состоит из четы
рехвеществ, триизкоторыхпослеобработ
ки AlCl
3
имеют в УФ свете желтую флуо
ресценцию, четвертое окрашено в зелен
ный цвет и относятся они к флавонолам.
Фракцию III элюировали из колонки
90% ным этанолом. Она содержит шесть
веществ, из которых четыре по реакциям
с ванилиновымреактивоми
n
толуолсуль
фокислотой относятся к лейкоантоциани
динам, а остальные два — к флавон 3 4
диолам.
Количественный состав препарата ис
следовали денсиметрическим методом.
Для этого хроматограммы препаратов об
рабатывали 1% нымазотнокислымсереб
ром в 25% ном аммиаке, высушивали в
темноте и пропускали через денситометр
системы Шипалова. Применяли синий
светофильтр с максимумом пропускания
света 450 нм. Площади, очерченные кри
вой поглощения, измеряли планиметром
Электронная Научная СельскоХозяйственная Б блиотека