ЭлБиб

ТЕХНОЛОГИИ ЗАГОТОВКИ, ХРАНЕНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРМОВ

www.kormoproizvodstvo.ru

ͪКормопроизводствоͫ № 7, 2014

Микотоксины образуются при благоприятных

условиях для роста грибов на зерновых культурах

в поле, при уборке урожая, хранении, кормопроиз-

водстве (Palmgren, 1986; Moussa, 2013).

Накопление микотоксинов в пищевых продук-

тах и кормах представляет собой серьёзную угро-

зу для здоровья человека и сельскохозяйственных

животных, поскольку они могут вызывать разви-

тие рака, мутагенные, желудочно-кишечные, уро-

генитальные, сосудистые, почечные и нервные

расстройства. Некоторые микотоксины также яв-

ляются иммуносупрессантами и, следовательно,

снижают резистентность к инфекционным заболе-

ваниям. Примером опасности, которую представ-

ляют собой микотоксины, может служить вспышка

алиментарно-токсической алейкии, которая приве-

ла к гибели тысяч людей на Урале и в Поволжье в

30–40-х годах ХХ века (Саркисов, 1954). Значитель-

ные экономические потери связаны с их воздей-

ствием на здоровье человека и продуктивность

животных (Байбаков, 2010; Awad, 2011; Food safety

and quality, 2013).

Существенное число основных микотоксинов

продуцируется грибами рода

Fusarium

, которые

встречаются по всему миру и являются частыми

контаминантами фуражного зерна. Температура и

влажность — основные климатические факторы,

влияющие на развитие грибов

Fusarium

(Doohan,

2003). Влажный период вегетации и последующая

холодная погода повышают вероятность наличия

грибов, особенно

Fusarium

и их микотоксинов, в

зерне. Высокая влажность зерна способствует ро-

сту грибов, а низкая температура — образованию

микотоксинов (Popovski, 2013). В большинстве слу-

чаев заражённость зерна микотоксинами, опас-

ными для теплокровных в зависимости от их вида,

находится в интервале 15–35%. Применение пре-

паратов для борьбы с микотоксинами наиболее

экономически рационально, когда установлен факт

загрязнённости зерна. Это позволяют сделать раз-

личные тест-системы (Прогноз развития рынка пре-

паратов для борьбы с микотоксикозами, 2010). Не-

обходимо отметить, что в Российской Федерации

предельно допустимые концентрации микотокси-

нов, характерных для грибов рода

Fusarium

, вве-

дены в 1996 году и имеют максимальные значения

(мг на 1 кг зернового сырья): ДОН — 1, Т-2 токсин —

0,1, зеараленон — 1,0.

Благоприятные условия для роста специфиче-

ского организма могут возникнуть как в поле, так

и в хранилище. Идеальные условия для роста ми-

целиев грибов зависят от вида, но обычно токси-

генные грибы нуждаются в высокой температуре и

влажности. Заражение грибами может произойти

на разных стадиях производства зерна: в поле, при

транспортировке и хранении (Eckard, 2011).

На сегодняшний день основным методом диа-

гностики заражённости образцов продовольствен-

ного зерна токсигенными возбудителями фузарио-

за является фитопатологическая экспертиза, вклю-

чающая выделение чистой культуры гриба и мор-

фологический анализ. Эти процедуры трудоёмки,

занимают длительное время, а конечный результат

зависит от опыта и квалификации сотрудников, вы-

полняющих анализ. Кроме того, часто заболевание

протекает бессимптомно, и установить характер

и степень заражения по визуальным признакам

практически невозможно (Parry, 1995). Другим ши-

роко используемым подходом является анализ

содержания микотоксинов в пробах с помощью

хроматографических и иммунохимических мето-

дов. Однако необходимо отметить, что отсутствие

микотоксина не означает отсутствия его продуцен-

та — при изменении условий хранения, а также

под воздействием факторов внешней среды может

начаться накопление токсического соединения в

образце.

Продуцирование токсинов имеет выраженный

видоспецифичный характер (Moss, 2004; Glenn,

2007). Точные сведения о видовом составе проду-

центов, присутствующих в партии зерна, позволяют

прогнозировать, какие именно токсины могут при-

сутствовать или накопиться в нём при изменении

условий хранения и под воздействием биотических

или абиотических стрессов.

Полимеразная цепная реакция широко исполь-

зуется в настоящее время для обнаружения того

или иного фрагмента ДНК в пробе путём значитель-

ного наращивания его концентрации для возмож-

ности дальнейшего визуального обнаружения в

виде флуоресценции. При этом происходит копиро-

вание только того участка, который удовлетворяет

заданным условиям, и только в том случае, если он

присутствует в исследуемом образце.

Одним из наиболее эффективных подходов для

быстрой и чувствительной диагностики и иденти-

фикации патогенов, является метод ПЦР, а также его

модификации с детекцией флуоресценции в про-

цессе амплификации, то есть копирования участ-

ков ДНК. Для этого используется количественная

полимеразная цепная реакция или ПЦР в реальном

времени — ПЦР-РВ (Sarlin, 2006; Nicolaisen, 2009;

Fredlund, 2010; Stakheev, 2011). Этот метод позволяет

в течение нескольких часов получить результат ис-

следования, при этом в отличие от «классической»

ПЦР, где результаты анализируются с помощью

гель-электрофореза, детекция результатов про-

изводится, минуя его, что практически полностью

позволяет избежать контаминации ампликонами

и, как следствие, исключает возможность получе-

ния ложно-положительных результатов анализа.

Другим важным преимуществом ПЦР-РВ является

возможность количественной оценки содержания

специфической ДНК патогена в пробе.

Цель исследований—продемонстрировать воз-

можность диагностики заражённости возбудителя-

ми фузариоза комбикормов для различных видов

сельскохозяйственных животных, а также зерна ос-

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека