ЭлБиб

ТЕХНОЛОГИИ ЗАГОТОВКИ, ХРАНЕНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРМОВ

ͪКормопроизводствоͫ № 7, 2014

www.kormoproizvodstvo.ru

УДК 619 : 14.4 + 636.2.085.54

ФУЗАРИОЗ И ДИАГНОСТИКА ЗАРАЖЁННОСТИ

КОНЦЕНТРИРОВАННЫХ КОРМОВ

ЕГО ОСНОВНЫМИ ВОЗБУДИТЕЛЯМИ

А. А. СТАХЕЕВ*, кандидат биологических наук

Р. В. НЕКРАСОВ**, кандидат сельскохозяйственных наук

Е. А. ГЛАДЫРЬ**, кандидат биологических наук

С. К. ЗАВРИЕВ*, доктор биологических наук

* Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова

117997, Россия, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 16/10

E-mail:

stakheev.aa@gmail.com

** ВНИИ животноводства

142132, Россия, Московская обл., Подольский р-н, пос. Дубровицы, д. 60

E-mail:

nek_roman@mail.ru elenagladyr@mail.ru

В настоящей статье продемонстрирована возможность использования метода количественной ПЦР (полиме-

разной цепной реакции в реальном времени, ПЦР-РВ) для диагностики и количественной оценки заражённо-

сти комбикормов основными возбудителями фузариоза. С помощью предлагаемого метода установлена сте-

пень заражённости продуцентами микотоксинов образцов комбикормов для различных видов животных, а

также зерна нескольких сельскохозяйственных культур. Использование метода ПЦР для обнаружения токси-

генных грибов рода Fusarium в концентрированных кормах позволяет за короткое время охарактеризовать

видовой состав патогенов и таким образом спрогнозировать спектр микотоксинов, накопление которых воз-

можно в конкретном образце. На сегодняшний день основным методом диагностики заражённости образцов

продовольственного зерна токсигенными возбудителями фузариоза является фитопатологическая эксперти-

за, включающая выделение чистой культуры гриба и морфологический анализ. Кроме того, часто заболевание

протекает бессимптомно, и установить характер и степень заражения по визуальным признакам практически

невозможно. Другим широко используемым подходом является анализ содержания микотоксинов в пробах с

помощью хроматографических и иммунохимических методов. Однако необходимо отметить, что отсутствие

микотоксина не означает отсутствия его продуцента, при изменении условий хранения, а также под воздей-

ствием факторов внешней среды может начаться накопление токсического соединения в образце. Продуциро-

вание токсинов имеет выраженный видоспецифичный характер. Точные сведения о видовом составе проду-

центов, присутствующих в партии зерна, позволяют прогнозировать, какие именно токсины могут присутство-

вать или накопиться в нём при изменении условий хранения и под воздействием биотических или абиотиче-

ских стрессов. Для проведения анализа нами было получено 14 образцов. Для выделения ДНК использовали

протокол, рекомендованный Европейской комиссией для количественной оценки содержания ГМО в образ-

цах зерна. Для оценки достоверности эксперимента выделение ДНК из каждого образца проводили в двух по-

вторностях. В целом концентрация и качество препаратов ДНК были выше для семян, и несколько ниже — для

комбикормов. В наших исследованиях использовался пороговый метод анализа. Он предполагает определе-

ние значения порогового цикла (С

), показывающего момент в ходе реакции, когда количество ДНК в реакци-

онной пробирке (соответственно и флуоресцентный сигнал) достигает одинаковой для всех образцов порого-

вой величины. Следовательно, значение С

обратно пропорционально содержанию специфической ДНК в ре-

акционной смеси. В настоящей работе показано, что комбикорма, использующиеся для кормления сельскохо-

зяйственных животных, могут быть существенно заражены продуцентами микотоксинов.

Ключевые слова:

фузариоз, микотоксины, концентрированные корма, ПЦР-РВ.

лесени и микотоксины в продуктах питания и

кормах для животных — большая проблема во

всём мире. Микотоксины — это токсичные и/или

канцерогенные соединения, образуемые различны-

ми видами грибов, которые растут на разнообраз-

ных сельскохозяйственных продуктах (Cullen, 1994).

Электр нная Научная СельскоХозяйственная Библиотека