ЭлБиб

тайное появление устойчивых растений в процессе культивирования

vitro

наблюдалось и у другой клеточной линии — Т-340, полученной из

тетраплоидного сорта Tapioi Poli. При этом процент выживших расте

ний после инокуляции их

in vitro

патогеном (в пробирке) составил

Однако балл устойчивости этих растений при оценке методом увядания

был выше (0,6), чем у регенерантов клеточных линий ТР и Тетра ВИК 7.

Таким образом, культивирование

in vitro

растений клевера луго

вого приводило к не индуцированному появлению растений-

регенерантов с повышенной устойчивостью к раку.

Клеточная селекция клевера лугового на устойчивость к болезням

Изменения, возникающие на клеточном уровне, но не проявляю

щиеся у растений-регенерантов в виде видимых изменений, могут быть

обнаружены и выделены в процессе культивирования

т vitro

в селек

тивных условиях, которые создают благоприятные условия для увели

чения темпа пролиферации устойчивых клеток.

В качестве селектирующего фактора могут быть использованы

непосредственно сам патоген, экстракт патогена, фильтрат культураль

ной жидкости и частично или полностью очищенный токсин гриба или

аналог этого токсина.

Гриб

Sclerotinia trifoliorum

хорошо растет на питательных средах,

используемых нами для культивирования клеточных культур клевера

лугового (полная среда В

Гамборга с гормональными добавками). При

инокуляции агрессивным изолятом культуры патогенна гриб за 4-5

дней распространялся по всей поверхности культуры (каллус, эмбрио-

генная ткань) и быстро приводил к ее гибели независимо от происхож

дения клеточной культуры. Поэтому культура гриба для отбора устой

чивых генотипов нами не использовалась.

Несмотря на то, что уже во многом известен механизм взаимодей

ствия между патогеном, т. е. грибами рода

Sclerotinia spp.,

в частности,

Scl. trifoliorum

Eriks, и растением-хозяином

Trifolium pratense

, до сих

пор основной токсин, играющий первостепенную роль в патогенезе, не

идентифицирован. В связи с этим для отбора устойчивых генотипов

клевера лугового мы использовали культуральный фильтрат (КФ) гриба

Scl. trifoliorum.

Избирательность действия КФ на клеточные культуры клевера лу

гового зависела от его концентрации. При разведении 1 : 400 из 236 кле

точных культур, полученных из пяти сортов, не было выявлено ни од

ной, выдерживающей эту концентрацию, независимо от ее происхожде

ния. При снижении концентрации до 1 : 500 жизнеспособность клеточ

ных популяций значительно варьировала (табл. 4).

223

Научная электронная библиотека ЦНСХБ