227 / 294
4. Влияние культурального фильтрата
S c l tr ifo lio rum
Eriks,
на жизнеспособность и эмбриоидогенез клеточных культур клевера лугового
Клеточная
линия
Исходный
сорт
Жизнеспособность клеток
суспензионных культур,
%
Количество
эмбриогенных структур,
шт./мл суспензии
селективная
среда
(КФ 1 : 500)
контроль
(среда В5)
селективная
среда
(КФ 1 : 500)
контроль
(среда В5)
ТР
ВИК 7
79,5 ± 3,4
91,1 ±2 ,9
18,9 ±4,1 26,1 ±3 ,0
Тетра ВИК 7 ВИК 7
81,1 ±2 ,6
95,1 ±3 ,0
19,8 ±2 ,2 23,1 ± 1,9
Р-127
ВИК 7
16,9 ±2 ,9
94,3 ± 2,3
0
123,5 ±4 ,9
Т-340
Tapioi Poli
80,8 ±2 ,6
92,1 ± 1,9 28,0 ±3 ,0 35,9 ± 1,2
В-40
Vogones
43,8 ± 1,5
90,4 ±2,1
3,6 ±1 ,2
5,0 ±0 ,4
Наименьшее снижение жизнеспособности отмечалось у клеточ
ных линий, полученных из тетраплоидных генотипов. Наименьшую ус
тойчивость к КФ показала диплоидная клеточная линия Р-127. В даль
нейших исследованиях ее использовали в качестве тест-объекта для
подбора концентрации КФ, обладающего селективным действием. Та
ковой считали минимальную концентрацию КФ, при которой достига
лось снижение жизнеспособности клеток Р-127 до 15-20 %.
Образование эмбриоидов в опытных вариантах, показавших ус
тойчивость к КФ клеточных линий, было достоверно ниже, чем в кон
трольных вариантах (при Р < 05). В процессе культивирования в среде
с КФ отдельные эмбриоиды погибали, другие оставались зелеными и
после пересадки на среду для регенерации образовывали морфогенную
каллусную ткань, побеги и растения-регенеранты.
Перед высадкой в грунт полученные регенеранты оценивали на
устойчивость к патогену
Scl. trifoliorum
Eriks. Для этого их пересажива
ли на среду того же состава, но без сахарозы и через трое суток иноку-
лировали патогеном. При этом было установлено, что количество ус
тойчивых растений значительно варьирует (табл. 5).
Предварительная селекция на клеточном уровне повысила частоту
устойчивых растений среди регенерантов клеточной линии Т-340 на
85,3 %, ТР на 62,3 %. Тетра ВИК 7 на 52,8 %. Растения, полученные из
клеточной линии В-40 сорта Вегонэс, оказались полностью неустойчи
выми к патогену. Видимо устойчивость клеточных культур к КФ, из ко
торых они были регенерированы, не была генетически обусловленной, а
определялась физиологической адаптацией клеток к селективным усло
виям.
По-видимому, добавление КФ в среду для культивирования кле
точных суспензий создает благоприятные условия для пролиферации и
последующей дифференциации клеток и клеточных агрегатов, характе-
224
Н учная электронная библиотека ЦНСХБ