222 / 294
В связи с этим в отделе биотехнологии разработано несколько
приемов для увеличения выхода дедифференцированных клеточных
культур с высокой регенерационной способностью (PC).
Во-первых, среди большого числа генотипов сортообразца на сре
дах, разработанных для модельного сорта ВИК 7, проводят скрининг
клеточных линий.
Во-вторых, для отдельных генотипов с хозяйственно ценными
признаками экспериментальным путем определяют состав питательных
сред, обеспечивающих PC.
В-третьих, способность к регенерации индуцируют путем скре
щивания растений без PC с растениями-регенерантами того же образца
(Солодкая, 1987).
В процессе манипуляций, проводимых в течение всего процесса
регенерации, в частности при длительном культивировании на средах с
высоким содержанием гормонов, возникает сомаклональная изменчи
вость. В связи с этим для сохранения всех ценных селекционных при
знаков исходного образца разработаны методы сохранения исходных
генотипов.
Переход на новый путь развития — от соматической клетки до
целого растения, сопровождается цитогенетической нестабильностью.
Включаются ранее не работающие гены, клетки проходят адаптивный
период, и популяция начинает приспосабливаться к условиям культиви
рования
in vitro.
Среди растений-регенерантов клевера лугового, полученных из
клеток суспензионных культур, наблюдалась большая сомаклональная
вариабельность признаков. Подсчет хромосом в пазушных листьях (2-
Змм) 534 регенерантов клевера лугового показал, что 211 растений
имели исходный диплоидный набор хромосом (2п = 2х = 14), а осталь
ные были тетраплоидами (2п = 4х = 28). Тетраплоидные растения харак
теризуются более крупными размерами соцветий, листовых пластинок,
более толстыми стеблями. Установлено, что выход полиплоидов среди
растений-регенерантов возрастает с увеличением длительности культи
вирования суспензионных культур. Так, число полиплоидов, получен
ных из клеточных культур 111-У11 пассажа в среднем варьирует от 0 до
14,6 %, У111-Х11 пассажа — от 20,1 до 66,9 %, Х111-ХУ1 пассажа —
более 86,9 %. При регенерации растений из длительно культивируемой
клеточной культуры увеличивается выход анеуплоидов. При этом резко
снижается выживаемость растений-регенерантов при пересадке их из
пробирок в вегетационные сосуды с почвой (табл. 1).
Анеуплоидные растения характеризовались пониженной фер
тильностью пыльцы, аномальным строением цветков (имели 1—4 пести-
219
Научная электронная библиотека ЦНСХБ