28
ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 3, 2010
против
β
-ла то лоб лина (рис. 3,
а
). В сл чае
α
-ла т-
альб мина в рез льтате тепловой обработ и анти ена
при 80...90 °С наблюдается смещение линии преци-
питации (рис. 3,
б
,
1
–
6
),
азывающее на меньше-
ние оличества имм но-реа тивно о протеина. Пре-
ципитат
α
-ла тальб мина сохраняется во всем ис-
след емом температ рном диапазоне.
Сывороточный альб мин, подвер н тый термоде-
нат рации при 80...90 °С, с щественно теряет анти-
енные свойства (рис. 3,
б
,
5
–
6
).
Та им образом, для
β
-ла то лоб лина и сыворо-
точно о альб мина по азано с щественное сниже-
ние способности связывать антитела при темпера-
т рной обработ е свыше 70 °С, то да а
α
-ла таль-
б мин — наиболее термостабильный омпонент сре-
ди исслед емых сывороточных бел ов.
Из чение имм нореа тивности идролизатов тер-
мообработанных сывороточных бел ов позволило
становить, что при онцентрации фермента 0,02 %
смещается линия преципитации и меньшается о-
личество преципитата –[
β
-ла то лоб лин–Ат] —
(рис. 4,
а
,
1
–
6
) в идролизатах, подвер н тых предва-
рительной температ рной обработ е при 70...80 °С.
С орее все о, это связано со снижением эффе тив-
ности взаимодействия денат рированно о
β
-ла то-
лоб лина с антителами (см. рис. 3), та а по ре-
з ль-татам эле трофоретичес о о анализа при пред-
варительной температ рной обработ е 70...90 °С
β
-ла то лоб лин идролиз ется 0,02 % трипсином
лишь на 20 % (см. рис. 2). При онцентрации трип-
сина 0,25 % преципитат в идролизатах нативных и
тер-мообработанных бел ов не выявляется (рис. 4,
б
,
2
–
6
). Пол ченные данные сопоставимы с рез льта-
тами эле трофоретичес их исследований, по азав-
ших пра тичес и полный идролиз
β
-ла то лоб -
лина под действием высо их онцентраций трип-
сина (см. рис. 2,
б
).
В рез льтате анализа имм нореа тивности сыво-
роточных альб минов в идролизатах, пол ченных с
использованием 0,02 % трипсина, выявлена артина
преципитации, хара терная для термизированных
бел ов (см. рис. 3,
б
,
в
), что свидетельств ет о низ ой
протеолитичес ои а тивности трипсина по отноше-
нию данным омпонентам сыворот и озье о мо-
ло а (рис. 4,
в
). Это подтверждают и рез льтаты эле -
трофореза, со ласно оторым наблюдается лишь ча-
стичный протеолиз
α
-ла тальб мина после предва-
рительной тепловой обработ и бел ово о с бстрата
при 80...90 °С. Тем не менее отмечено снижение им-
м нореа тивности а термообработанно о бел ово-
о с бстрата (см. рис. 3,
б
), та и е о идролизатов
трипсином (см. рис. 4,
в
) по сравнению с онтроль-
ными образцами. При идролизе сывороточно о аль-
б мина после е о предварительной температ рной
Рис. 2. а – рез льтаты эле трофоретичес о о анализа бел-
ов сыворот и озье о моло а и прод тов их идролиза
трипсином (денат рир ющий эле трофорез, 16 % ПААГ): ис-
ходная сыворот а (1); сыворот а, обработанная 0,02%-ным
трипсином без предварительно о на ревания (2) и при на ре-
вании до 50 °С (3), 60 °С (4), 70 °С (5), 80 °С (6), 90 °С (7); сы-
ворот а, обработанная 0,25%-ным трипсином без предвари-
тельно о на ревания (8) и при на ревании до 50 °С (9), 60 °С
(10), 70 °С (11), 80 °С (12), 90 °С (13); I – сывороточный аль-
б мин; П – азеин; III –
β
-ла то лоб лин; IV –
α
-ла таль-
б мин; б – степень идролиза
α
-ла тоальб мина,
β
-ла то-
лоб лина и сывороточно о альб мина трипсином в сыворот е
озье о моло а в зависимости от температ ры ее предвари-
тельной обработ и:
– ла то лоб лин (0,02 % трипсин);
– ла то лоб лин (0,25 % трипсин);
– ла тальб -
мин (0,02 % трипсин);
– ла тальб мин (0,25 % трип-
син);
– сывороточный альб мин (0,02 % трипсин);
– сывороточный альб мин (0,25 % трипсин)
б
100
80
60
40
20
0
Нативный бело в смеси, %
30
50
70
90
Температ&ра, °С
а
а
б
Рис. 3. Двойная радиальная имм нодифф зия (по Ухтерлони)
в а арозном еле термизированных сывороточных бел ов с
использованием антисыворот и против
β
-ла то лоб лина
(а) и
α
-ла тальб мина (б): исходная озья сыворот а (1); сы-
ворот а, на ретая до 50 °С (2); 60 °С (3); 70 °С (4); 80 °С (5);
90 °С (6); антисыворот а (7); I – линия преципитации ом-
пле са -[
β
-ла то лоб лин–Ат]-; II – омпле са -[
α
-ла т-
альб мин–Ат]-; III - омпле са -[БСА–Ат]-
2
2
4
5
6
7
3
3
4
5
7
6 1
1
I
II
III
Элек ронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека