ЭлБиб

66 / 100

64 ПИЩЕВАЯ ПРОМЫШЛЕННОСТЬ 12/2012
CЫРЬЕ И ДОБАВКИ
Ключевые слова: переработка тык
вы; пектин; степень этерификации;
биоантиоксиданты; антиоксидантная
активность; клеточные модели.
Key words: pumpkin processing;
pectin; etherification degree;
bioantioxidants; antioxidant activity;
cell culture models.
УДК 664.292; 591.133
Одна из приоритетных задач пи
щевой промышленности – обеспече
ние населения продуктами питания,
обладающими функциональными
свойствами и способствующими
профилактике социально значимых
заболеваний. К их числу принадле
жат сердечно сосудистые заболева
ния, ожирение и диабет II типа,
объединяемые в кластер метаболи
ческого синдрома [1, 2]. Важную
роль в развитии данных заболева
ний играют процессы свободноради
кального окисления [3]. Именно по
этому создание функциональных пи
щевых продуктов и ингредиентов,
обладающих антиоксидантными
свойствами, в настоящее время при
обретает особое значение.
К числу важнейших компонентов
пищи человека относят пищевые во
локна, в частности, пектиновые ве
щества, которые кроме благоприят
ного действия на желудочно кишеч
ный тракт обладают широким спект
ром функциональных свойств [4].
Гипохолестеринемические, гипогли
кемические, пребиотические, жела
тирующие и студнеобразующие
свойства пектинов лежат в основе их
широкого использования в качестве
детоксикантов, стабилизаторов,
студнеобразователей при производ
стве как продуктов питания массово
го потребления, так и диетического,
лечебно профилактического назна
чения [5]. Пектины из различных ис
точников проявляют антиоксидант
ные свойства [6], что позволяет со
здать на их основе широкую линейку
продуктов функционального пита
ния. Антиоксидантный эффект пек
тинов обусловлен наличием в их со
ставе остатков гидроксибензойных и
гидроксикоричных кислот, образую
щих сложноэфирные связи с остат
ками галактуроновой кислоты [7,8].
При расщеплении пектиновых поли
сахаридов под действием микро
флоры толстого кишечника феноль
ные соединения высвобождаются и
оказывают местный антиоксидант
ный эффект. Помимо собственного
антиоксидантного эффекта одна из
установленных функций пектинов –
транспорт пищевых антиоксидантов
(витамин С, каротиноиды, феноль
ные соединения) в желудочно ки
шечном тракте и их защита от дегра
дации в кислой среде желудка [9,
10]. Таким образом, ключевой мише
нью для антиоксидантного действия
пектиновых полисахаридов в орга
низме человека являются именно
клетки эпителия кишечника. Поэтому
тестирование антиоксидантных эф
фектов пектинов in vitroцелесооб
разно проводить на моделях эпите
лия кишечной стенки. Среди ком
мерчески доступных клеточных ли
ний человека наибольшее распрост
ранение как модели эпителия ки
шечника приобрели линии клеток
аденокарциномы кишечника НТ 29 и
Caco 2, реже используются линии
T84, SW480, SW620, CasKi и некото
рые другие [11]. Кроме того, благода
ря способности образовывать моно
слои, достаточно широкое распрост
ранение в качестве модели кишеч
ного эпителия получила клеточная
линия некишечного происхождения
MDCK1 (Madin Darby canine kidney).
Целью данного исследования было
сравнительное изучение антиокси
дантных свойств пектинов из различ
ных растительных источников in vitro
на линиях клеток HT 29 и MDCK1.
Объектами исследования в насто
ящей работе были высокоэтерифи
цированные пектины из различных
растительных источников: пектин
средней садки, полученный из тык
венного жома по кавитационно
мембранной технологии [12]; пектин
медленной садки из яблочного жмы
ха APA 103 (Yantai Andre Pectin Co.,
Китай); пектин среднебыстрой садки
из яблочного жмыха АPA 104 (Yantai
Andre Pectin Co., Китай), пектин
очень медленной садки из цитрусо
вого жмыха АРА 105LV (Yantai Andre
Pectin Co., Китай).
Перед тестированием антиокси
дантных свойств пектинов в них ус
танавливали массовую долю влаги и
степень этерификации по ГОСТ
29186–91. Массовую долю пектино
вых веществ в исследованных образ
цах пектина определяли кальций
пектатным методом [13]. Содержа
ние полигалактуроновой кислоты в
пектинах выявляли колориметричес
ким методом [14]. Общее содержа
ние фенольных веществ в пектинах
определяли спектрофотометричес
ким методом с использованием ре
актива Фолина Чокальтеу [15] и вы
ражали в миллиграммах эквивален
тов галловой кислоты (ЭГК) в расче
те на 1 г. Динамическую вязкость
1 % ных растворов пектинов тести
ровали в универсальном буфере
(0,04 М борная кислота, 0,04 М ук
сусная кислота, 0,04 М фосфорная
кислота, рН 4,5) при 23 °С методом
ротационной вискозиметрии на вис
козиметре Brookfield LVDV II+Pro.
Анализ антиоксидантных свойств
пектинов проводили на клеточных
линиях аденокарциномы кишечника
человека НТ 29 и почки собаки
MDCK1 в условиях экзогенной ин
дукции оксидативного стресса пе
роксильными радикалами, образую
щимися в результате термического
распада 2,2’ азобис (2 метилпропи
онамидина) дигидрохлорида (AAPH,
Sigma, США). Интенсивность внут
риклеточных свободнорадикальных
процессов определяли с помощью
флуоресцентного зонда – дихлороф
луоресцина диацетата (DCFH DA,
Sigma, США).
Клетки линий HT 29 и MDCK1 вы
ращивали в культуральных пласти
ковых матрацах (Costar, США) при
37 °С в атмосфере с 5 % углекислого
газа на средах Игла MEM и ДМЕМ
соответственно с добавками 10 %
эмбриональной телячьей сыворотки,
гентамицина и L глютамина. Клетки
снимали с поверхности пластика ра
створами Версена и трипсина, отде
ляли клеточную массу центрифуги
рованием и ресуспендировали ее в
культуральной среде. 100 мкл кле
Сравнительный анализ
антиоксидантных свойств пектинов
из различного растительного сырья
К.В. Лисицкая, канд. биол. наук, А.А. Торковa, И.В. Николаев , канд. хим. наук,
Т.В. Федорова, канд. техн. наук, О.В. Королева
Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
М.А. Михалева , канд. экон. наук
ЗАО «НПО «Европа Биофарм», г. Волгоград
Элект
нная Научная СельскоХ зяйственн я Библиотека