ЭлБиб

ПРОИЗВОДСТВО БИОЛОГИЧЕСКИ - АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ с

п о м о щ ь ю

_____________________ НЕТРАДИЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИИ____________________

ВЫСОКОЭФФФЕКТИВНЫЙ КАЛЛУСОГЕНЕЗ ВКУЛЬТУРЕТИССА

IN VITRO

ПавловА.В., ТырышкинЛ.Г., ПинаеваМ.Ю.

Ст.-Петербургская Химико-фармацевтическая Академия, 197376, Ст.-

Г1етербург,ул. проф. Попова 14.

Культура тисса

in viiro

является одним из альтернативных подходов

для получения лекарственного препарата таксола и таксанов, которые

используются в медицине для лечения различного типа опухолей.

Большинство успешных работ по введению в культуру

in vitro

тисса

проведены д ля

Taxus brevifolia

(Gibson et all, 1993, Ketchum et all, 1995),

который широко распространен в Северной Америке, но на территории

России и стран ближнего зарубежья отсутствует. Создание

быстрорастущих каллусных культур видов рода

Taxus,

растущих в

нашей стране может позволить решить проблему получения как таксола,

так и нозых таксанов, пригодных для лечения опухолей.

Зрелые зародыши, мегагаметофты, отрезки хвои и стеблей

изучались на способность к каллусогенезу у видов

T.baccata,

T.cuspidata, T .canadensis.

Первичные экспланты стерилизовали

гипохлоритом натрия (5%), отмывали водой и помещали на питательные

среды в чашки Петри и инкубировали при 25°С в темноте.

качестве

основной использовали среду

В5

с различным содержанием сахаров и

ауксинов. Через 14 дней после начала культивирования учитывали

процент первичных эксплантов, давших начало каллусу и размер

каллусов.

Как по частоте каллусогенеза, так и по ростовому индексу на среде

с сахарозой и 2,4 D при использовании в качестве первичного экспланта

хвои Т. cuspidata превосходил остальные изучаемые виды. При

использовании среды со смесью сахаров мальтозы и фруктозы (по 1

%) и 2,4,5 Т в качестве ауксина 100 % эксплантов хвои и стеблей всех

видов образовывали каллусы ; для индукции каллусогенеза из

мегагаметофитов лучшей была среда с тем же составом сахаров и с

парахлорфеноксиуксусной кислотой в качестве ауксина.

Базальная часть хвои образует каллус значительно быстрее, чем

средняя или дистальная от стебля и образующиеся каллусы, имеют

большую скорость роста. Вероятно, это связано с наличием в этой части

листа большего количества меристематически активных клеток.

Полученные первичные каллусы используются для создания

стабильных таксолпродуцирующих клеточных линий.

502

Научная электронная библиотека ЦНСХБ