ЭлБиб

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ

МОНО-ИДВОЙНЫЕ ТРАНСФОРМАНТЫ КАРТОФЕЛЯ С

ЧУЖЕРОДНЫМИГЕНАМИПОДКОНТРОЛЕМПАТАТИНОВОГО

ПРОМОТОРА

Романов Г.А., Константинова Т.Н., Аксенова Н.П., Сергеева Л.И.,

Голяновская С.А., Гукасян И.А., *ШмюллингТ ., **Коссманн Й.,

**ВильмитцерЛ.

Институт физиологии растений РАН, 127276Москва, Россия;

*Университет г. Тюбингена, D-72076 Тюбинген

Германия;

**Макс-ПланкИнститутмолекулярной физиологиирастений, D-14476 Гольм,

Германия

Получена серия моно- и двойных трансформантов картофеля сорта

Дезире, куда с помощью

A.tumefaciens

введены гены гоlВ и rolС из А.

rhizogenes, дрожжевой инвертазы и малой субъединицы ADPG

пирофосфорилазы (последний - в антисмысловой ориентации). Ген

инвертазы и го/-гены поставлены под контроль клубнеспецифичного

промотора пататина В33, а генADPG пирофосфорилазы - конститутивного

промотора 35S CaMV. Двойные трансгены получены путем

последовательной трансформации и содержали комбинацию из генов

го/С+инвертаза и rolB+(aHTn)ADPG пирофосфорилаза. Наличие и

экспрессия встроенных генов в трансгенных растениях были

подтверждены с помощью Nothern-блотов и анализа соответствующих

ферментативных активностей. Полученные растения выращивали в

стерильной культуре

in vitro

в фитотроне при различных режимах и

определяли их основные морфологические параметры, включая

хара ктеристики клубнеобразования. Контролем служили как

нетрансформированные растения того же сорта, так и аналогично

трансформированные растения, но содержащие лишь маркерные гены

(NPTII и GUS). Наибольшие фенотипические отклонения проявляли

растения с геном rolC, одним или в комбинации с геном инвертазы, что

выражалось в атипичной удлиненной форме клубней и общем усилении

вегетативного роста. Последнее наблюдалось также у некоторых клонов,

содержащих ген го/В. При выращивании линий на средах с различным

содержанием сахарозы выяснилось, что трансформанты с геном

инвертазы формируют клубни при более низких, а трансгены с rolC,

наоборот, при более высоких концентрациях сахарозы, чем контроль.

Эти и другие результаты обсуждаются с точки зрения пригодности

культуры

in vitro

для предсказания полевых качеств трансгенного

картофеля.

зоо

Научная электронная библиотека ЦНСХБ