ЭлБиб

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ

ГЕНETИЧECKAЯTPAHCФ OРMAЦИЯМЯГКОЙПШЕНИЦЫ

ПухальскийВ.А., СмирновС.П.,КоростылеваТ.В., БилинскаяЕ.Н.,

ЕлисееваА.А.

Институт общей генетики им. Н.И. ВавиловаРАН, 117809Москва, ул. Губкина 3,

E-Mail:

pukhalsk@vigg.r

Были проведены исследования по трансформации растений яровой

мягкой пшеницы

(Triticum aestivum L .)

с использованием

A.tumefaciens.

В качестве вектора использовали штамм С158

A .tum e faciens

содержащий коинтеграт двух плазмид: "разоруженной” Ti-плазмиды

PGV2260 и векторной pSIR42. Плазмида pSIR42 представляет собой

вектор pST6 со встроенной под контроль 35S CaMV-промотора

последовательностью , содержащей инвертированные повторы

размером 0,35 тпн из гена устойчивости к тетрациклину плазмиды

pBR322. Агробактерии наносили на пестик цветка после принудительного

опыления в полевых условиях. Завязывание зерен составило 3%.

Растения первого поколения не имели морфологических отличий от

контроля. Анализ геномной ДНК методом дотгибридизации и ПЦР-анализа

подтвердил присутствие рекомбинантной ДНК у части растений.

От них было получено второе поколение, в растениях которого также

была обнаружена чужеродная ДНК. Повторение трансформации

избранным методом в условиях теплицы дало аналогичный результат.

Частота трансформации составила

2,7%.

Следовательно описанный

способ трансформации дает возможность эффективно интегрировать в

геном мягкой пшеницы рекомбинантнуюДНК, которая передается через

зерновки растениям последующих поколений.

29 8

Научная электро ная библиотека ЦНСХБ