ЭлБиб

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ

ПОЛУЧЕНИЕТРАНСГЕННЫХРАСТЕНИЙЛЯДВЕНЦАРОГАТОГО

(

LOTUS CORNICULATUS),

УСТОЙЧИВОГОКГЕРБИЦИДУ

БИАЛФ ОСУ

Стефанович А.М., Ралдугина Г.Л., Горелова С.В.

Институт физиологии растении им.К.А. Тимирязева РАН

С пособность Т -ДН К агробактерий стабильно включаться в геном

х о з я и н а д а е т в о з м о ж н о с т ь и с п о л ь з о в а т ь ее д л я ге н е т и ч е с ко й

т р а н сф о р м а ц и и р а с ти те л ь ны х кл е то к. Л я д в е н е ц рога ты й

(Lotus

corniculatus),

- кормовое растение из семейства бобовых, отличающееся

хорош ей урожайностью и высокой устойчивостью к неблагоприятным

погодным условиям . В культуре

in vitro

было выделено два клона с

высокой регенерационной способностью (частота регенерации 70-80%),

которы е трансф орм ировали методом сокультивирования сегментов

ч ереш ков и ночной культуры агробактерии, несущей "разоруженную "

плазмиду

pTiBo

542 с генами устойчивости к гигромицину и канамицину

и ге н о м bar, ко т о р ы й о б у с л а в л и в а е т у с т о й ч и в о с т ь к ге р б и ц и д у

ф осф инотрицину (биалофосу) (автор конструкции - Ревенкова К.С.,

И нж е н е р ны й ц е н тр РАН "Б и ои нж ен е ри я "). Р е ге не ри р о в а вш и е на

селективной среде (50 мг/л Км) зеленые побеги нормально укоренялись

на среде для черенкования, также содержащей Км. Наличие генов nptll

в р а сте н и я х-тр а н сф о рм а н та х бы ло по д тв е рж д е н о м е тод ом PCR .

Высаженные в почву трансгенные растения не отличались по фенотипу

от контрольны х, ц ветки были фертильными и образовы вали после

опыления семена. PCR -анализ рандомизировано выбранных растений

Т1 подтвердил наличие в них гена

nptll.

4 клона трансгенны х растений,

устойчивы х к биалоф осу в условиях

in vitro

, были вы сажены в сосуды с

почвой в условиях теплицы. Растения были обработаны опрыскиванием

1 % раствором биалофоса из расчета 0,4 кгд.в./га. Обработку проводили

в начале цветения лядвенца. На 7 день после применения гербицида

контрольны е растения полностью погибали, а у трансгенны х растений

ч е р е з 2 н е д е л и п о с л е о п р ы с к и в а н и я в е г е т а ц и я п о л н о с т ь ю

восстанавливалась.

3 0 6

Научная электрон ая библ отека ЦНСХБ