ЭлБиб

ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 12, 2014

Применение имм]нохимичесZих методов анализа

для оценZи аллерYенности молочных прод]Zтов

Ключевые слова

аллерYенность, бета-лаZтоYлоб]лин, YипоаллерYен-

ные молочные прод]Zты, имм]ноанализ, имм]ноблот-

тинY, имм]ноферментный анализ.

Реферат

На примере бета-лаZтоYлоб]лина рассмотрены имм]-

нохимичесZие методы анализа, позволяющие ос]-

щестzвлять Zонтроль аллерYенных белZов при произ-

водстве YипоаллерYенных молочных прод]Zтов. Перс-

пеZтивность применения имм]ноанализа об]словле-

на еYо высоZой производительностью, ч]вствительно-

стью и специфичностью. Дана сравнительная хараZ-

теристиZа возможностей и оYраничений различных им-

м]нохимичесZих методов, вZлючая имм]нофермент-

ный анализ, имм]ноблоттинY и имм]нохроматоYрафию.

Представлены данные по применению разработанно-

Yо ZонZ]рентноYо имм]ноферментноYо метода опре-

деления содержания бета-лаZтоYлоб]лина для Zонт-

роля исходноYо сырья и прод]Zтов еYо переработZи

при производстве YипоаллерYенных молочных про-

д]Zтов. Особенность предложенноYо метода — Zине-

тичесZий режим анализа, соZращающий еYо с]ммар-

н]ю продолжительность до 1,5 ч, и проведение всех

стадий при Zомнатной температ]ре (в отличие от

большинства имм]ноферментных наборов, треб]ю-

щих наYревания до 37 °С). Рабочий диапазон имм]но-

ферментноYо определения бета-лаZтоYлоб]лина — от

0,03 до 2,5 мZY/мл, причем рез]льтаты измерений

отражают с]ммарное содержание ZаZ нативных моле-

Z]л, таZ и фраYментированных, но сохранивших анти-

Yенные детерминанты. Рассмотрено применение им-

м]ноблоттинYа для хараZтеристиZи с]ммарноYо со-

держания и соотношения аллерYенных Zомпонентов.

Кроме тоYо, представлены сведения о ZоммерчесZи

дост]пных имм]нодиаYностиZ]мах, предназначенных

для Zонтроля аллерYенных белZов молоZа. В целом

проведенный анализ свидетельств]ет об эффеZтив-

ности имм]нохимичесZих методов для обнар]жения и

ZоличественноYо определения аллерYенных Zомпонен-

тов при производстве YипоаллерYенной молочной про-

д]Zции.

Авторы

Зверева Елена Анатольевна, Zанд. биол. на]Z

СафенZова Ирина ВиZторовна, Zанд. биол. на]Z

Смирнова Наталия Ивановна

Дзантиев Борис Борисович, д-р хим. на]Z

Жердев Анатолий Витальевич, Zанд. биол. на]Z

Инстит]т биохимии имени А.Н.Баха РАН

119071, МосZва, ЛенинсZий проспеZт, 33

e-mail:

zverevaea@yandex.ru

Юрова Елена Анатольевна, Zанд. техн. на]Z

Харитонов Владимир Дмитриевич, д-р техн. на]Z

ВНИИ молочной промышленности РАН

115093, МосZва, ]л. ЛюсиновсZая, 35/7

e-mail:

ilmoloko@mail.ru

The Use of Immunochemical Analysis Methods to Assess

Allergenicity of Dairy Products

Keywords

allergenicity, beta-lactoglobulin, hypoallergenic dairy

products, immunoassays, immunoblotting, immunoassay

analysis.

Abstract

On the example of beta-lactoglobulin are considered im-

munochemical methods of analysis for the verification of

allergenic proteins in the production of hypoallergenic

milk products. Prospects of using immunoassay due to

its high performance, sensitivity and specificity. The com-

parative characteristic of the capabilities and limitations

of various immunochemical methods, including enzyme-

linked immunosorbent assay, and immunoblotting immu-

noassay. The data on the application of the developed

competitive enzyme immunoassay method for the deter-

mination of beta-lactoglobulin to control the source of

raw materials and products of its processing in the pro-

duction of hypoallergenic dairy products. The peculiarity

of the proposed method — the kinetic analysis mode, it

shortens the total length of up to 1.5 hours, and carrying

out all steps at room temperature (in contrast to the

majority of immunoassays kits require heating to 37 °C).

The working range of enzyme immunoassay determina-

tion of beta-lactoglobulin — from 0.03 to 2.5 mg/ml, and

the measurement results reflect the total content of both

the native molecules and fragmented, but keep the anti-

genic determinants. The application for immunoblotting

characteristics and the ratio of the total content of aller-

genic components. In addition, the article provides infor-

mation about commercially available immuno-diagnos-

tics, designed to control the allergenic milk proteins. In

general, the analysis demonstrates the effectiveness of

immunochemical methods for the detection and quantifi-

cation of allergenic components in the production of

hypoallergenic dairy products.

Authors

Zvereva Yelena Anatolyevna, Candidate of Biological Science

Safenkova Irina Viktorovna, Candidate of Biological Science

Smirnova Nataliya Ivanovna

Dzantiev Boris Borisovich, Doctor of Chemical Science

Zerdev Anatoliy Vital’yevich, Candidate of Biological Science

Institute of Biochemistry named after A.N.Bakh

33, Lenisky Prospekt, Moscow, 119071

e-mail:

zverevaea@yandex.ru

Yurova Yelena Anatolyevna, Candidate of Technical Science

Kharitonov Vladimir Dmitrievich, Doctor of Technical Science

Institute of Dairy Industry

35/7, Lyusinovskaya St., Moscow, 115093

e-mail:

ilmoloko@mail.ru

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека