16
ХРАНЕНИЕ И ПЕРЕРАБОТКА СЕЛЬХОЗСЫРЬЯ, № 12, 2014
В настоящее время наблюдается nвеличение рас-
пространения аллерgичесjих реаjций на jомпо-
ненты jоровьеgо молоjа, частота jоторых n детей
младшеgо возраста достиgает 7,5 % [1, 2]. В связи с
этим востребованность gипоаллерgенных молочных
продnjтов возрастает. Объемы их производства и
потребления наращиваются, поэтомn особnю аj-
тnальность приобретают вопросы jонтроля степе-
ни аллерgенности.
При орgанизации реgnлярноgо мониторинgа наи-
более эффеjтивное средство решения этой задачи —
определение содержания основных аллерgенных
jомпонентов, не требnющее длительных и трnдоем-
jих тестирований непосредственноgо аллерgичес-
jоgо эффеjта на тех или иных моделях.
В соответствии с реjомендациями Междnнарод-
ноgо союза иммnнолоgичесjих сообществ (Interna-
tional union of immunological societies) j основным
аллерgенам jоровьеgо молоjа относят
α
-лаjталь-
бnмин,
β
-лаjтоgлобnлин (БЛГ), сывороточный аль-
бnмин, а таjже
α
-s
1
-,
α
-s
2
-,
β
- и
κ
-jазеины [1, 3].
Специфичность и интенсивность аллерgичесjоgо от-
вета j этим белjам индивидnальна.
Каj правило, сенсибилизация развивается сразn j
несjольjим соединениям. Основным аллерgеном мо-
лоjа оправданно считается БЛГ, что обnсловлено jаj
еgо высоjим содержанием (50% белjов сыворотjи и
оjоло 10% всех белjов jоровьеgо молоjа), таj и эф-
феjтивной индnjцией аллерgичесjих реаjций [4].
Разнообразные аналитичесjие методы, вjлючая
различные варианты жидjостной хроматоgрафии
[5] и элеjтрофореза [6], позволяют jонтролировать
содержание белjов молоjа в продnjтах питания. Но
данные методы применяются исjлючительно в ис-
следовательсjих целях и не использnются на праj-
тиjе, тем более при мониторинgе продnjции в тор-
gовой сети. Необходимо отметить, что отсnтствие еди-
ных подходов и требований, а таjже стандартизо-
ванных методов для оценjи аллерgенности приво-
дит j незначительномn производствn таjих продnj-
тов. Для jонтроля gипоаллерgенности необходимо
иметь единые подходы j оценjе аллерgенности мо-
лочных продnjтов, стандартизованнnю методиjn из-
мерений (МИ).
В настоящей статье рассмотрены иммnнохими-
чесjие методы анализа и представлены примеры их
применения. Перспеjтивность этих методов обn-
словлена не тольjо высоjой производительностью,
достаточной чnвствительностью и специфичностью
[7], но и возможностью и достnпностью примене-
ния в аналитичесjих лабораториях, испытательных
центрах и производственных лабораториях.
Основными способами снижения аллерgенности
молочных продnjтов являются частичный фермен-
тативный gидролиз и термообработjа [3, 8]. Эти воз-
действия вызывают разрnшение антиgенных детер-
минант и изменение jонформации белjовых моле-
jnл. Поэтомn в продnjте обработjи моgnт содер-
жаться антиgенные детерминанты БЛГ или иноgо
аллерgенноgо белjа, сохранившие стрnjтnрn и спо-
собность инициировать аллерgичесjие реаjции n
сенсибилизированных потребителей, но не входя-
щие в состав нативных молеjnл. Детеjция именно
всей совоjnпности антиgенных детерминант (иммn-
ноанализ) с дополнительным анализом их лоjали-
зации в нативных или фраgментированных белjах
дает наиболее адеjватнnю ин-формацию об аллер-
gенности пищевой продnjции.
Представленные в статье эjспериментальные
данные относятся j jонтролю БЛГ jаj основноgо ал-
лерgенноgо белjа, однаjо при необходимости пред-
лаgаемые подходы моgnт быть реализованы в сис-
темах мnльтипараметричесjоgо иммnноанализа,
обеспечивающих одновременный jонтроль всех ос-
новных аллерgенов молоjа.
Цель проведенноgо исследования — хараjтеристи-
jа возможностей иммnно-химичесjих методов для
оценjи аллерgенности при производстве gипоаллер-
gенных молочных продnjтов.
Материалы и методы. При проведении работы
использовали следnющие реаgенты: полиjлональ-
ные антитела jролиjа против БЛГ GTX77272
(«GeneTex», США), jонъюgат антител быjа против
IgG jролиjа с пероjсидазой («Медgамал», Россия),
БЛГ, Тритон Х-100, 3,3',5,5'-тетраметилбензидин,
трис (Sigma, США), N,N,N’,N’-тетраметилэти-
лендиамин (ТЕМЕД), персnльфат аммония (ПСА),
2-мерjаптоэтанол, натрия додецилсnльфат (ДДС),
бромфеноловый синий, 3,3'-диаминобензидин (MP
Biomedicals, Велиjобритания), jnмасси синий R–250
(Bio-Ra, США), gлицерин, изопропанол («Химмед»,
Россия). Все вспомоgательные реаgенты (соли, jис-
УДК 637/034
Применение имм]нохимичесZих методов анализа
для оценZи аллерYенности молочных прод]Zтов
Канд. биол. наnj Е.А.ЗВЕРЕВА; jанд. биол. наnj И.В.САФЕНКОВА; Н.И.СМИРНОВА;
д-р хим. наnj, профессор Б.Б.ДЗАНТИЕВ; jанд. биол. наnj А.В.ЖЕРДЕВ
Инститnт биохимии имени А.Н.Баха, g. Мосjва
Канд. техн. наnj Е.А.ЮРОВА; д-р техн. наnj, профессор В.Д.ХАРИТОНОВ
ВНИИ молочной промышленности, g. Мосjва
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ХРАНЕНИЯ И ПЕРЕРАБОТКИ СЕЛЬХОЗПРОДУКЦИИ
Электр нная Научная Сел скоХозяйственная Библиотека