ЭлБиб

КЛЕТОЧНАЯ СЕЛЕКЦИЯ

СТАБИЛИЗАЦИЯ СИНТЕЗААЛКАЛОИДА БЕРБЕРИНА В

КЛЕТОЧНЫХ КЛОНАХ

THALICTRUMMINUS

Осипо в а Е.А., Цыбулько Н.С., Шамина З.Б.

Институт физиологии растений им . К .А.Тимирязева РАНМосква, 127276,

Ботаническаяул. 35fax: (095) 482-16-85E-Mail:

При селекции клеточных клонов, продуцентов биологически

активных соединений, очень трудно выбрать критерии отбора.

Использование селективных систем дает возможность получить

резистентные к селективному фактору варианты, но это не всегда

коррелирует с синтезом вторичных метаболитов. Поиск визуальных

маркеров может облегчить селекцию продуктивных клонов. В этом

отношении

Thalictrum minus

хороший объект, так как количество

синтезируемого берберина, коррелирует с окраской клеток и среды.

Получение стабильных по многим признакам клеточных линий

з а т р у д н е н о в свя зи с зн а ч и тел ь н о й в а р и а б е л ь н о с т ью при

субкультивировании. Поэтому важно знать, когда и как оценивать клоны

в отсутствие селективных факторов.

Для решения этой задачи первично отобранные по интенсивности

окраски агаровой среды 7 клонов переводили в суспензию и далее, в

течение 20 пассажей, анализировали содержание берберина в

культуральной жидкости суспензии, используя спектрофото метрический

метод.

В течение первых восьми субкультивирований содержание

берберина в клонах, как правило, не превышает его количества в

контроле и варьирует в значительных пределах от пассажа к пассажу

(коэффициент вариации от 50 до 90%, в контроле - 30%). Через полтора

года культивирования выделены клоны, в которых уровень содержания

берберина в среде стабилизировался, что сопровождалось снижением

коэффициента вариации. За этот период в одних клонах наблюдали

четкое и достоверное снижение содержания алкалоида, в других -

повышение.

В результате проведенной работы было получено два клона 124 и

233 с содержанием берберина до 420 и 440 м г/л , соответственно, что

превосходит контроль в 2,5 раза.

3 2 7

Научн я электронная библиотека ЦНСХБ