310 / 592
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ
ПОЛЕВЫЕХАРАКТЕРИСТИКИТРАНСГЕННЫХРАСТЕНИЙ
КАРТОФЕЛЯ
ХромоваЛ.М.,КрашенинниковаЛ.В.,КукушкинаЛ.Н., БашиловаН.А.,
НикитинаМ.Н.
ВНИИКХ, Коренево, Московская обл., Россия.
На базе 10 сортов картофеля была получена 91 линия Km-
устойчивых растений-регенерантов. В качестве целевого гена при
трансформации использовали:1.ген, кодирующий фермент бета-1,3-
эндоглюканазу; 2. Гены pro А и pro В osm
Escherichia соli;
З.Ген
человеческого
α
-интерферона; 4. Фрагмент ДНК, кодирующий синтез
днРНК; 5. Ген транспортного белка вируса табачной мозаики;6.Ген
транспортного белка ts-чуствительного по транспорту мутанта вируса
табачной мозаики; 7. Ген глю козоизомеразы (xyl)
Е .соli;
8 .Ген
изопентилтрансферазы (T-cyt) из Ti-плазмиды
A.
tumefaciens
нопалинового
типа; 9. Ген d-эндотоксина
Bacillus thuringiensis.
В составе векторной
молекулы данные целевые гены находились под контролем CMV 35S-
промотора и терминатора гена нопалинсинтазы. Трансгенная природа
растений подтвержд а л а с ь путем укоренения на среде, содержавшей
канамицин. Вдальнейшем факт трансформации был показан: а.методом
б л о т -ги б р и д и з а ц и и по С а у зе р н у ; б .п р о б о й на а кти вн о с ть
н е о м и ц и нф о сф о т р а н сф е р а зы ; в .м е то д ом цепной реа кции
полимеризации. Далее растения в течение 2 лет оценивались в полевых
питомниках с соблюдением правил биобезопасности. Отмечена высокая
частота встречаемости среди трансгенных линий повышенной на 2-3
балла устойчивости к фитофторозу, черной ножке и кольцевой гнили, а
также увеличения процентного содержания крахмала и урожайности
клубней. Разные трансгенные линии, содержащие вставку одного и того
же гена, имели различные морфологические и физиологические
изменения. Растения, трансформированные векторными плазмидами,
несущ ими маркерные гены без значащ е го гена, имели те же
особенности.
310
Науч ая электронная библиотека ЦНСХБ