ЭлБиб

иноделие

иноградарство

5/2015

виноГРАДАРСТВО

Название видов дрожжей при-

водится по систематике Kurtzman

и др. [4].

Результаты и обсуждение.

При-

менение метода прямого выделения

и метода накопительных культур

при определении таксономического

состава дрожжевых грибов ягод ви-

нограда показало, что видовой состав

дрожжей, независимо от способа вы-

деления, отличается разнообразием.

Все изолированные дрожжи относят-

ся к аскомицетам и их анаморфам.

При ферментации сусла выде-

лено 8 видов дрожжей, а при де-

сорбции клеток с последующим

посевом — 7, из них 3 вида —

Pichia

terricola, Lachancea thermotolerans

и Hanseniaspora uvarum

обнаружены

в обоих вариантах (см. таблицу).

Культивирование дрожжей

на виноградном сусле позволи-

ло выделить виды

S. cerevisiae,

C. zemplinina, P. manshurica,

P. Occidentalis, H. opuntiae

, отсут-

ствие которых при применении

прямого метода может иметь раз-

личные причины, среди которых:

интенсивность колонизации ягод

этими видами или адгезивные свой-

ства субстрата и дрожжевой клет-

ки. Известно, что вид

S. cerevisiae

крайне редко удается изолировать

прямым выделением в связи с его

низкой численностью на винограде,

где он, по существующему мнению,

обнаруживается в среднем только

на 1 из 1000 ягод [5]. Метод нако-

пительных культур, применяемый

ранее, при изучении дрожжевых

грибов винограда в 8 биотопах цен-

тральной и южной части Дагестана,

показал повсеместную распростра-

ненность этого вида [6], в то вре-

мя как при прямом методе вид

S. cerevisiae

не был обнаружен [7].

Представители пульхерримин-

продуцирующих дрожжей видов

Metschnikowia spp

. — типичные оби-

татели цветков и сочных плодов.

Согласно полученным результатам

они выделялись только при прямом

высевании (в 16 из 27 чашек Пе-

три наблюдали рост колоний этих

дрожжей). Ранее было отмечено,

что

Metschnikowia

относятся к груп-

пе дрожжей, наиболее часто выделяе-

мых с винограда Дагестана [8].

Также методом прямого выде-

ления были изолированы «черные

дрожжи» —

A. pullulans,

относящие-

ся к эврибионтам, не имеющим вы-

раженных экологических преферен-

думов и представленных в самых

разных местообитаниях, однако в ли-

тературе имеются сведения об их вы-

делении из ферментированных ви-

номатериалов [9]. Учет результатов

прямого посева показал наличие

колоний «черных дрожжей» во всех

вариантах рассева (27 чашек Петри).

Применение метода прямого посева

при изучении количественного со-

става дрожжей позволило выявить,

что средняя доля этого вида на раз-

личных субстратах (ягоды, листья,

почва, опад) составляла более 90%,

внося основной вклад в значение

численности дрожжей [7].

Имеющиеся сведения об изоляции

Metschnikowia

A. pullulans

из вино-

материалов [9] позволяют предпо-

ложить, что при определенных усло-

виях ферментации (рН, температура

брожения, взаимоотношения с дру-

гими микрооганизмами) эти дрожжи

способны развиваться в виноградном

сусле.

Показаны существенные различия

в таксономическом составе дрожжей

винограда в зависимости от применя-

емого метода изоляции. Полученные

данные свидетельствуют, что для вы-

деления более полного спектра видов

дрожжей целесообразно комплексное

применение методов.

Благодаря развитию молекулярно-

биологических методов и фило-

генетической систематики оба

культуральных способа позволили

обнаружить дрожжи, выделенные

как отдельный вид в последние деся-

тилетия. Эти таксоны расположены

на едином филогенетическом дереве

грибов, их описание вошло в послед-

нее издание определителя дрожжей

[4].

Так, например, в группе дрожжей,

изолированных при накопительном

способе,

C. zemplinina

, как отдельный

вид, была выделена в рамках ревизии

Candida stellata

на основании анали-

за нуклеотидных последовательно-

стей [10].

H. opuntiae

, обнаруженная

на кактусах Гавайских островов,

а позже и на винограде Австралии

и Греции, получила статус отдель-

ного вида, так как отличалась от бли-

жайших разновидностей 2‑мя к 4‑ем

основным заменам в регионе D1/D2

[11,4].

M. chrysoperlae

, как вид, изо-

лирован в 2004 г. из семейства зеле-

ной златоглазки (

Chrysoperlacarnea

)

класса насекомых и был описан

на основании различий от близкого

вида

M. pulcherrima

в морфологии,

физиологии и 6‑ти заменах в D1/D2

LSU последовательности рибосом-

ного гена. Открытие

M. chrysoperlae

стало частью исследования дрожжей,

найденных в пищеварительном трак-

те златоглазок [12].

Метод прямого выделения, на ко-

тором базируются экологические

исследования дрожжевых грибов,

позволил выявить широкое распро-

странение базидиомицетов в раз-

личных природных местообитаниях

[1]. Изучение сезонной динамики

дрожжевых грибов, ассоциирован-

ных с виноградным растением и по-

чвой, показало приуроченность бази-

диомицетов, наряду с аскомицетами,

к этим субстратам. При исследовании

72 образцов субстратов отмечены

следующие показатели обилия бази-

диомицетовых дрожжей:

Cryptococcus

magnus

(5),

Sporisorium penniseti

(0,05),

Rhodotorula glutinis

(1,25) [7].

Таксономический состав дрожжей при различных методах выделения

Вид дрожжей (на ягодах)

Метод выделения

прямой

накопительный

Saccharomyces cerevisiae

–

Hanseniaspora uvarum

Hanseniaspora opuntiae

–

Metschnikowia aff. сhrysoperlae

–

Metschnikowia aff. рulcherrima

–

Meyerozyma guilliermondii

–

Candida zemplinina

–

Pichia manshurica

–

Pichia occidentalis

–

Pichia terricola

Lachancea thermotolerans

Aureobasidium pullulans

–

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека