ПИВО
и
НАПИТКИ
2
•
2014
34
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
кислоту; янтарная и яблочная кисло-
ты при сбраживании концентрирован-
ных мелассных растворов действуют
на ферменты гексокиназу, фосфофрук-
токиназу, ответственные за образова-
ние из глюкозы фруктозодифосфата.
Особенно чувствительны дрожжи
к органическим кислотам при опреде-
ленных значениях pH. Кроме того,
степень токсичности органических
кислот находится в прямой зависи-
мости от количества атомов углерода
в молекуле кислоты. Так, муравьиная
кислота снижает коэффициент раз-
множения дрожжей, но практически
не вызывает отмирания клеток. Срав-
нительно слабым ингибитором являет-
ся и уксусная кислота [10].
Суммарное содержание низко-
молекулярных органических кис-
лот в опытной и контрольной сре-
дах составляло соответственно
17,86 : 19,22 г/л. В количественном
отношении преобладали уксусная
и молочная кислоты; для обоих вари-
антов сред отмечена закономерность:
муравьиная, щавелевая, яблочная, ли-
монная и янтарная кислоты представ-
лены в незначительном количестве.
Как видно из рис. 1, содержание ука-
занных органических кислот в средах
культивирования почти идентично,
за исключением незначительно пре-
обладающей в контроле молочной
кислоты.
В процессе брожения органические
кислоты активно метаболизируются
дрожжевыми клетками [14, 15]. По-
сле брожения наблюдается снижение
содержания всех органических кислот
и за счет их этерификации [10].
Исследование динамики содержа-
ния свободных органических кислот
в сброженных субстратах выявило
их значительное снижение во всех ва-
риантах (рис. 2). Так, уксусная, щаве-
левая и яблочная кислоты полностью
отсутствовали, а муравьиная была
обнаружена лишь в контрольном ва-
рианте
S. сerevisiae Y-503
(7,5%
от первоначального количества в сре-
де). Лимонная кислота отсутствовала
во всех вариантах, кроме опытного
варианта субстрата, сброженного
S. оviformis М-12Х
, где обнаружено
8,9% от первоначального количества
в среде. Молочная кислота не выяв-
лена лишь в опытном варианте суб-
страта
М-12Х
, при этом в контроле ее
содержание от исходного количества
составляло 4,9%; в опытном вариан-
те субстрата, сброженном
Y-503
, —
5,9%, в контроле — 4,6%. Янтарная
кислота отсутствовала в опытном ва-
рианте
М-12Х
, в контроле обнаружено
34,6%; в опытном варианте
Y-503
—
59,6%, в контроле—52,4%от перво-
начального количества в среде.
При сбраживании мелассы, кроме
основных продуктов спиртового бро-
жения (этанола и углекислого газа),
в результате сбраживания сахаров об-
разуются вторичные продукты (в том
числе лимонная, уксусная, янтарная,
молочная кислоты), которые в даль-
нейшем могут быть использованы
дрожжами в процессах метаболизма.
Так, уксусная кислота, полностью
отсутствующая в сброженных суб-
стратах (см. рис. 2), при спиртовом
брожении, возможно, используется
дрожжами для построения аминокис-
лот, белков и жиров [10]. Органиче-
ские кислоты участвуют и в образо-
вании побочных метаболитов. Ранее
в результате исследований летучих
примесей во всех вариантах сбро-
женных субстратов выявлен этило-
вый эфир уксусной кислоты [16, 17].
Однако контрольные варианты обоих
штаммов существенно отличались ко-
личеством данного синтезируемого по-
бочного продукта: при использовании
S. сerevisiae
—737,44:747,54 мг/дм
3
(опыт : контроль) и
S. оviformis
М-12Х
— 788,21 : 806,32 мг/дм
3
(опыт : контроль). Очевидно, присут-
ствие в среде культивирования дрож-
жей биологически активных веществ
геотермальной воды, ускоряющих те-
чение процесса спиртового брожения
[18, 19], повлияло на обмен иссле-
дуемых органических кислот. Более
низкое содержание этилового эфира
уксусной кислоты в отгонах сброжен-
ных опытных субстратов, вероятно,
связано с изменением регуляторных
функций клетки, а также со специфи-
кой обмена органических кислот и от-
личительными свойствами различных
штаммов дрожжей. Так, суммарное
содержание низкомолекулярных
органических кислот в субстратах,
сброженных
S. сerevisiae
, в контроле
составляло 7,1% от первоначального
количества в среде, в опыте — 7,8%;
в контрольномварианте
S. oviformis
—
5,2%, опытном—0,56%.
Таким образом, обнаружено, что
содержание исследуемых свободных
органических кислот в сброжен-
ных субстратах зависит не только
от условий культивирования, но
Рис. 2.
Содержание органических кислот (мг/л) в мелассных субстратах,
сброженных дрожжами
S. cerevisiae Y-503
(
a
) и
S. oviformis M-12X
(
б
)
1200
1000
800
600
400
200
0
Муравьиная
Уксусная
Молочная
Щавелевая
Янтарная
Контроль Опыт
Яблочная
Лимонная
700
600
500
400
300
200
100
0
Муравьиная
Уксусная
Молочная
Щавелевая
Янтарная
Контроль Опыт
Яблочная
Лимонная
а
б
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека