402 / 540
методом прямой спектрофотометрии без предварительного хроматографического
разделения с последующим расчетом содержания пигментов по уравнениям Вет-
штейна и Хольма для ацетона.
Для количественного определения фикоцианина был разработан метод спек
трофотометрии. Данный способ основан на измерении оптической плотности
водного экстракта, полученного из биомассы спирулины после экстракции ацето
ном. В качестве стандартного образца использовали субстанцию фикоцианина,
выделенного из биомассы спирулины. Спектры поглощения водного экстракта из
биомассы спирулины и стандартного образца фикоцианина совпадают. Максимум
поглощения в спектрах наблюдается при длине волны 620 нм, данная длина вол
ны была выбрана в качестве аналитической.
Для установления зависимости оптической плотности от концентрации рас
твора фикоцианина был построен калибровочный график. Исследования показали
наличие зависимости оптической плотности раствора фикоцианина при длине
волны 620 нм от значения pH, поэтому для приготовления раствора использовали
фосфатный буферный раствор с pH 7,0. Закон Бугера-Ламберта-Бера соблюдается
в интервале концентраций от 0,01 до 0,1 % при фиксированном значении pH. По
калибровочному графику был определен удельный показатель поглощения, кото
рый в дальнейшем использовался при расчетах результатов количественного оп
ределения.
В качестве экстрагента для выделения фикоцианина из биомассы спирулины
использовали фосфатный буферный раствор с pH 7,0. В табл. 1 приведены сведе
ния о влиянии различных факторов на выход фикоцианина из биомассы спирли-
ны. Оптимальное извлечение достигается при измельчении сырья до размера час
тиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5' мм, при следующих
условиях экстракции: перемешивание на магнитной мешалке при комнатной тем
пературе в течение 30 мин, соотношение сырья и экстрагента 1:100. Исследования
показали, что при использовании метода трехкратной экстракции извлечение
происходит практически полностью.
381
Электро ная Научная СельскоХозяйственная Библиотека