ЭлБиб

хроматографии. Хроматографирование проводили в режиме градиентного

элюирования растворами (хлороформ-метанол) с различным соотношением

растворителей, причем состав менялся таким образом, чтобы его элюирующая

сила постоянно увеличивалась. В результате получили шесть фракций, в каждой

из которых проводили идентификацию фосфолипидов методами ТСХ и ИКС.

Следует отметить, что наибольшие сложности при идентификации связаны с

окислением конечного продукта. Кроме того, в зависимости от pH среды

фосфолипиды существуют в различной ионной форме.

Анализ методом ТСХ проводили на пластинках "Армсорб" и "Сорбфил" в

системе растворителей хлороформ-метанол-вода (19,5:7,5:1,2). Проявление

пластин осуществлялось следующими реагентами: родамин 6Ж (0,0012 %

раствор);

нингидриновый

реагент

(0,25

раствор

ацетоне);

фосфорномолибденовая кислота (5 % спиртовый раствор) и реагент Драгендорфа.

Параллельно ТСХ для определения индивидуальных фосфолипидов проводили

анализ методом ИКС. Для этого были сняты ИК-спектры фосфолипидов в шести

фракциях, полученных после хроматографирования фосфолипидного концентрата

на колонке с силикагелем. Анализ проводился методом раздавленной капли на

двухлучевом спектрофотометре марки "Specord-75 IR" (Германия) в диапазоне

400-4000 см

Чтобы удалить следы летучих растворителей образец сушат в

вокуум-эксикаторе над гранулированным NaOH. Затем каплю вещества помещали

между двумя пластинками из хлористого натрия и слегка сдавливали пластинки,

чтобы получить тонкую пленку вещества. Снимали ИК-спектр и проводили

отнесение характеристических полое поглощения.

В результате проведенного исследования методами ТСХ и ИКС в отходах

Амарантового масла установлено наличие следующих фосфолипидов:

фосфатидилхолин;

фосфатидные

кислоты,

фосфатидилэтаноламин;

лизофосфатидилэтаноламин; фосфатидилглицерин, фосфатидилинозитол,

фосфатидилсерин.

101

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека