В хлоропластах бобов добавление амарантина к среде инкубации
хлоропластов в концентрации 1-10 мМ (10
3
-10
4
молекул амарантина в расчете на
один РЦ ФСI) приводило к появлению дополнительного сигнала ЭПР с
параметрами g = 2,0037 0*0001, АН = (5,5
±
0,5) Гс. Как оказалось, этот сигнал
принадлежит амарантину. Исследования спектров ЭПР амарантина в присутствие
редокс-буфера при разных значениях редокс-потенциала и pH показали, что
амарантин дает сигнал ЭПР в восстановительных условиях при высоких pH
(pH
1 0
). Это означает, что сигнал ЭПР принадлежит анион-радикальной форме
амарантина (которая при низких pH, будучи протонированной, гораздо быстрее
дисмутирует), которая образуется в хлоропластах при восстановлении
амарантина каким-либо из компонентов электрон-транспортной цепи (ЭТЦ).
Чтобы локализовать участок взаимодействия амарантина с ЭТЦ, была
проанализирована зависимость появления сигнала ЭПР амарантина в
хлоропластах от спектрального состава освещения.
Оказалось, что
дополнительный сигнал возникает только при освещении хлоропластов светом,
возбуждающим ФС II (свет с длиной волны меньше 700 нм), т.е. восстановление
амарантина при его взаимодействии с ЭТЦ может происходить на участке от
ФС II до b/f-комплекса. В присутствие ингибитора ФС II DCMU сигнал
амарантина в суспензии хлоропластов также возникал при включении света,
возбуждающего ФС II. Это позволяет сделать вывод о том, что восстановление
амарантина происходит при взаимодействии именно с ФС И.
В то же время в хлоропластах амаранта дополнительный сигнал не
наблюдался ни при каких условиях освещения. При этом освещение
длинноволновым светом, возбуждающим только ФС I (свет с длиной волны
больше 700 нм), приводило к уменьшению концентрации окисленных центров
P
7
Q
0
* . Отсутствие сигнала восстановленного амарантина можно объяснить низкой
активностью ФС II в препаратах хлоропластов амаранта, которая и должна
наблюдаться у С<грастений NAD-МДГ группы, к которой относится амарант. О
низкой активности ФСН в наших препаратах можно было судить также и по
97
Электрон ая Научная СельскоХозяйственная Библиотека