серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота.
Использование МКА в иммуноферментном анализе значительно по-
высило чувствительность и специфичность метода при выявлении антител
к антигенам ВЛКРС [5].
Высокая чувствительность ИФА на основе МКА в отличие от РИД по
зволяет более эффективно исследовать пулы сывороток, полученные от
животных отдельного стада. С помощью данного метода можно выявлять
стада, в которых уровень инфицированности не превышает 1 %. Однако
ИФА и РИД не способны дифференцировать материнские (колостральные)
антитела у молодых животных от активных антител, продуцирующихся при
вирусной инфекции. В этом случае высокая чувствительность ИФА с при
менением МКА может затруднять оценку нормы продолжительности коло
стрального иммунитета, так кактест-ИФА позволяет выявлять материнские
антитела в более поздние сроки, чем РИД.
В работах некоторых авторов показано, что у 18—32
%
инфицирован
ных коров в период глубокой стельности антитела к ВЛКРС в сыворотке
крови не регистрировали, тогда как в молозиве этих животных они сохраня
лись на высоком уровне (Москалик Р.С. с соавт., 1996; Bause I. et al.., 1978;
Burridge M.J. et al., 1982)
Эти и другие недостатки серологических методов заставляют исследовате
лей разрабатывать новые более чувствительные и точные методы диагностики,
которые позволяют прямо осуществлять детекцию вируса. К ним относятся:
метод определения ДНК-провируса ВЛКРС в лейкоцитах крови животных с
помощью молекулярной гибридизации, а также метод полимеразной цепной
реакции (ПЦР), позволяющий обнаруживать минимальное количество копий
провирусной ДНК в образцах в течение латентного периода болезни [ 1,3,4].
У животных с незначительно повышенными морфологическими пока
зателями крови ПЦР позволяет достоверно отличать лейкемоидное состоя
ние организма от ранней стадии лейкозного процесса [4].
Целью данной работы было изучение диагностической ценности раз
ных коммерческих наборов и методов, применяемых в диагностике ВЛКРС.
М атери алы и методы» Работа была выполнена на базе лаборатории
лейкозов ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН, лаборатории биоинженерии ГНЦ ВБ
«Вектор».
Исследования проводились на материале от 120 коров в возрасте 3-7 лет:
интактных, инфицированных ВЛКРС и больных лейкозом. Животные при
надлежат хозяйствам Новосибирской области.
Забор крови осуществлялся из яремной вены животных стерильной иглой
с соблюдением правил асептики и антисептики в стерильные одноразовые про
бирки. Выделение сыворотки проводили по общепринятой методике.
По результатам РИД и гематологических исследований животных раз
делили на 3 группы: больные (в эту группу вошли гематологически боль
305
Научная электронная библиотека ЦНСХБ