ЭлБиб

1986), что с помощью существующих традиционных профилактических и

оздоровительных противолейкозных мероприятий полностью искоренить

это заболевание сложно.

Изоляция серопозитивных животных приводит к временному сниже

нию показателей инфицированности среди животных условно благополуч

ной группы, но через определенное время в стаде вновь выявляются живот

ные - вирусоносители.

ВЛКРС поражает В-лимфоциты, встраиваясь в геном клетки хозяина в

виде ДНК-копии (провируса). Интегрированный в клеточный геном прови

рус может долгое время не экспрессироваться, чем и объясняется длитель

ный латентный период заболевания. Провирусную ДНК в лимфоцитах пе

риферической крови можно выявить только с помощью ПЦР, которая явля

ется высоко чувствительным и специфическим методом прямой диагнос

тики возбудителя. Данный метод позволяет обнаружить провирусную ДНК

ВЛКРС через 1-2 недели после заражения и определить животных, которые

в серологических тестах реагируют отрицательно.

В то же время при масштабном использовании ПЦР — диагностики

возникают сложности в интерпретации результатов, так как совпадение дан

ных РИД и ПЦР - анализа по выявлению ДНК ВЛКРС составляет 60-100 %

(Бусол В.А. и соавт., 1999).

Поэтому, обоснована необходимость использования серологических

методов совместно с молекулярно-генетическими на основе ПЦР.

Метод ПЦР для выявления ВЛКРС широко используется в России в ос

новном в научных целях и за рубежом (Бусол В.А. и соавт., 1999; Прихвагги-

лова и соавт А.Б., 2000; Лиманский А.П. и соавт .,2001; Kelly E J.e t al., 1998;

D. Beierei. al., 1992; A. Ballagi-Pordany et. al., 1994; H. Fechner et. al., 2003;

D.W. Nagy e ta l., 2003;).

Полученные образцы крови от крупного рогатого скота различных по

род и хозяйств были исследованы в РИД и ПЦР. Результаты проведенных

исследований представлены в таблицах 1 и 2. Предложенный нами для выяв

ления провируса лейкоза крупного рогатого скота метод «гнездовой»

(«nestecb-ПЦР) с двумя парами праймеров обладает более высокой чув

ствительностью и специфичностью. Это метод, благодаря возможности

анализа результатов после первого раунда ПЦР, можно считать полуколиче-

ственным, так как позволяет оценивать количество провирусной ДНК, что

соответствуют различным стадиям субклинического течения инфекции (S.

Tajima et al., 1998). По результатам РИД сформировали 2 группы животных:

РИД - отрицательные и РИД - положительные. Из таблиц 1,2 видно, что при

исследовании РИД - отрицательных животных методом ПЦР в 14 случаях из

87 обнаружен провирус лейкоза КРС. По-видимому, антитела в сыворотке

крови этих животных присутствуют в титрах, которые не выявляются в РИД.

Имеются данные о том, что существуют особи, которые, будучи инфици

рованными, в течение длительного времени, иногда нескольких лет, имеют

300

Научная электронная библиотека ЦНСХБ