ЭлБиб

У Д К 619:578.821.21

Получение моноклональных антител, специфичных к

структурным антигенам вируса оспы овец

А.В. Машнин,\И.Ф. Вишняков,]АЛ. Стриженов

О. М. Стриженове

Всероссийский НИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии, г. Покров

Оспа овец - особо опасная (список А) высококонтагиозная

вирусная болезнь, характеризующаяся папулезно-пустулезными

поражениями кожи и слизистых оболочек, высокой заболеваемо

стью и летальностью.

На сегодняшний день для диагностики оспы овец исполь

зуют вирусвыделение в первичных культурах клеток ягнят, элек

тронную микроскопию, серологические реакции - РДП, РСК,

PH, РИФ, а также методы твердофазного иммуноферментного

анализа (ТФ ИФА) на основе поликлональных антител. Указан

ные методы не всегда отвечают основным требованиям, предъяв

ляемым к методам диагностики особо опасных инфекций -

высокая чувствительность, получение результатов в максималь

но короткие сроки, специфичность и воспроизводимость. Всем

вышеперечисленным требованиям отвечают методы ИФА на ос

нове моноклональных антител.

Целью наших исследований является разработка средств и

методов диагностики оспы овец на основе моноклональных анти

тел, обладающих специфичностью к структурным антигенам ви

руса оспы овец.

Для иммунизации мышей линии BALB/с - доноров им

мунных спленоцитов, при получении гибридом, секретирующих

специфические моноклональные антитела, использовали очи

щенный препарат вируса оспы овец (ВОО) штамма НИСХИ, по

лученный на перевиваемой культуре клеток почки овцы (ПО) с

инфекционной активностью 5 Ig ТЦДзо/см3. Иммунизация мы

шей включала три основные инъекции антигена (подкожно и

внутрибрюшинно) в сочетании с полным и неполным адъюван

том Фрейнда и одну бустерную инъекцию под капсулу селезен

ки. Через четыре дня после бустерной инъекции иммунные

спленоциты сливали с клетками мышиной миеломы линии SP-

2/0-Ag-14.1, дефектной по гену, кодирующему фермент ГГФРТ,

по методике Kohler and Milstein в нашей модификации. Начало

147

Науч ая электронная библиотека ЦНСХБ