ЭлБиб

КО Л Л Е КЦ И И КУ Л Ь Т У Р К Л Е Т О К И ТКА Н Е Й РАС ТЕН ИЙ ; М Е Т О Д Ы С О ХРАН ЕНИ Я

_________________________________________ ГЕ Н О Ф О Н Д А _________________________________________

КРИОСОХРАНЕНИЕСУСПЕНЗИОННОЙКУЛЬТУРЫКЛЕТОК

POLYSCIASF IL I C IFOLIA BA ILEY

Кривохарченко А.С., Черняк Н.Д ., Носов А.М.

Институт физиологии растений им.К.А.Тимирязева РАН,

г.

Москва,

Ботаническаяул. 35

При создании промышленного способа выращивания клеточных

культур-продуцентов, важной задачей является разработка метода

длительного надежного сохранения исходного штамма.

Изучали возможность криосохранения суспензионной культуры

клеток P.filicifolia - источника ценных вторичных соединений.

Клетки суспензионной культуры

Р. filicifo lia ,

находящиеся в

экспоненциальной фазе ростового цикла, смешивали с раствором

криопротектора (сахароза с глицерином) и помещали в 0,5 мл

пластмассовые трубочки. Трубочки устанавливали вертикально в

программный замораживатель и через 10 мин инициировали

кристаллизацию. Охлаждение проводили со скоростью 0,4 °С/мин до -

35 °С, после чего материал переносили в жидкий азот. Оттаивание

проводили на воздухе при комнатной температуре. Жизнеспособность

культуры после оттаивания составляла 30-35% от исходной. Клетки,

содержащиеся в трубочке, высевали на поверхность агаризованной

питательной среды в чашки Петри диаметром 40 мм. Рост клеток

наблюдали через 10-12 дней после высева. Через месяц клетки

ресуспензировали в жидкой питательной среде. Полученная суспензия

не отличалась от исходной по индексу роста. Следует отметить, что в

течение первых 5 пассажей агрегированность возобновленной

суспензии была больше, чем у исходной.

5 2 7

Научная электронная библиотека ЦНСХБ