345 / 592
М ОЛЕКУЛЯ РНО -БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСО БЕННО С ТИ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ
РА С ТИ Т ЕЛ ЬНЫ Х КЛЕТОК IN V ITRO
ИДЕНТИФИКАЦИЯНОВЫХГЕНОВСПОМОЩЬЮСИСТЕМЫАС/DS
ENHANCER-TRAP
Кочиева Е.З., *ФедоровН.
Кафедра с/х биотехнологии, ТСХА, Москва.
*Карнеги институт, Балтимор, США.
На основе Ac/Ds мобильного элемента кукурузы с использованием
бактериальных и растительных маркерных генов, были сконструированы
бинарные вектора для идентификации растений, в которых произошла
эксцизия транспозона из состава вектора и его повторная интеграция в
другое место генома. Наличие в конструкциях не содержащего промотор
гена В-глюкуронидазы (GUS) позволило идентифицировать транспозиции.
В результате трансформации растений арабидопсиса данными
конструкциями была получена система enhancer-trapp линий ,
п о з в о л яю щ и х м ар ки ро ва ть и и д е н тиф и ц и р о в а ть гены ,
транскибирующиеся лишь в определенных тканях и органах растений.
И споль зо вание нового метода TALL PCR по зволил о быстро
идентифицировать области, фланкирующие транспозоны, что в
результате позволило клонировать ряд новых генов, в том числе и новый
ген SSR16. Инсерция транспозона в последовательность этого гена
вызывала летальную мутацию, приводящую к остановке эмбрионального
развития на поздней глобулярной стадии. Ранее была показана
возможность транспозиции Ас элемента в геноме моркови, картофеля и
томатов, что дает возможность использования в этих растениях
полученной системы enhancer-trap для идентификации новых генов,
особенно генов дифференцировки.
345
Научная электронная библиотека ЦНСХБ