ЭлБиб

349 / 592

МОЛЕКУЛЯ РНО -БИОЛОГИЧЕСКИЕ О СО БЕННО С ТИ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ
РА С ТИ ТЕЛ ЬНЫ Х КЛЕТОК IN VITRO
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬМИТОХОНДРИАЛЬНОЙДНККАЛЛУСНОЙ
ТКАНИГОРОХАКДЕЙСТВИЮЩЕЛОЧИ,РНКАЗЫАИ РНКАЗЫН
МардамшинА.Г., СтупинА.П.
Отдел биохимии и цитохимии Уфимского научного центра РАН, Уфа, 450054,
пр. Октября, 69. E-mail:
Ранее нами было показано, что митохондриальная ДНК 4-х дневных
этиолированных проростков гороха посевного расщеплялась под
действием 0,2 М КОН, РНКазы А и РНКазы Н. Данное явление
обеспечивалось наличием в мтДНК рибонуклеотидов, ковалентно
связанных с дезоксирибонуклеотидами. Это может быть результатом
ош ибо к при би о си н те зе м тДНК или рибо ну кл ео тиды имею т
определенную функциональную нагрузку. Частичный ответ на данный
в о п р о с можно бы ло бы по л учи ть при анали зе со д ерж а н и я
р и б о н у к л е о т и д о в в т к а н я х растений ра зличной с тепени
дифференцировки. Для этих целей была выбрана каллусная ткань гороха,
инициированная из зрелых зародышей. Каллусную ткань культивировали
в течении двух лет в темноте на питательной среде Мурасиге и Скуга.
Пересадку проводили через каждые 30 дней. Митохондриальную ДНК
выделяли методом фенольной депротеинизации. Отделение мтДНК от
РНК осуществляли электроэлюцией в агарозном геле. Митохондриальная
ДНК каллусной ткани также оказалась чувствительной к действию
щелочи, РНКазы А и РНКазы Н. Степень ее чувствительности
варьировала в различных пассажах от 20 до 50%, а для мтДНК целых
растений (различные выделения) этот показатель был более стабилен
(20-30%). Возможно, что более высокая вариабельность содержания
рибонуклеотидов в мтДНК каллусной ткани связана с действием ряда
неконтролируемых факторов, влияющих на физиологическое состояние
каллусов. Это в свою очередь может приводить к различной степени
ошибок при биосинтезе мтДНК.
349
Научная электронная библиотека ЦНСХБ