

ПЕРВИЧНЫЙ МЕТАБОЛИЗМ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК
АМИЛОЛИТИЧЕСКИЕ ФЕРМЕНТЫ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРСЕМЯН
ЗЛАКОВЫХ
Хакимжанов А.А., Кузовлев В.А., Кривцун Т.Г., Каракеева Р.К., Фурсов О.В.
Институт молекулярной биологии и биохимии им.М .А .Айтхожина НЦБМН
-
АН
Казахстана, Алматы, 480012,у л .Досмухамедова (Мичурина), 86.
Культуры
in vitro
из тканей семян злаковых являются весьма
удобными объектами для изучения регуляции амилолитических
ферментов. Известно, что биосинтез гидролаз в прорастающий зерновке
сосредоточен в эпителии щитка (scutellum) и алейроновом слое.
Полученные на питательной среде МС (2 мг/л 2,4 Д) культуры клеток
изолированных щитков риса сорта Маржан (Oriza Sativa L.) и кукурузы
(Z e a M a y z , сор т У зб е кс ки й ) о б л а д а л и вы со кой а л ьф а -
амилазопродуцирующей способностью. Клетки суспензионной культуры
активно секретировали энзим (20-30% от общего белка) в культуральную
среду.
Изучены физико-химические свойства выделенного фермента.
Электрофоретический состав альфаамилазы гетерогенен и представлен
тремя группами компонентов, как и в прорастающих семенах. Изозимы
с высоким и низким pl имели близкие значения мол. масс 42-44 кД и
отличались по специфичности к различным циклодекстринам и
сродством к Соп-А-сефарозе. Выявленные особенности в свойствах у
изоформ альфа-амилазы могут указывать на существование различий
в их посттрансляционной модификации и путях секреции.
Исследовано влияние экзогенных ГК и АБК на рост каллусной
массы и уровень синтеза альфа-амилазы . Показано негативное
воздействие ГК на эти показатели в данной ауксин-зависимой культуре.
Н апр о ти в , А Б К и 2 ,4 -Д при со вм ес тном д е й с тви и о ка зы вали
кооперативный эффект, приводивший к увеличению амилазной
активности.
Вызывают интерес исследования как метаболической регуляции
(изменения в питательной среде) индукции а-амилазы в культивируемых
клетках, так и регуляция ее активности гормонами, ионами Са и внешней
температурой.
27
Научная э ектронная библиотека ЦНСХБ