ЭлБиб

23 / 592

ПЕРВИЧНЫЙ МЕТАБОЛИЗМ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК
ИССЛЕДОВАНИЕ СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ ВКУЛЬТИВИРУЕМЫХ
КЛ ETKAXPANAXGINSENG
КИРИЛЛОВАН.В., КОМОВЮ.В.
Санкт-Петербургская химико-фармацевтическая академия,197376
С-Петербург,ул.проф.Попова,д.14, E -m ail:
Защита аэробных клеток от токсичных интермедиатов кислорода
обеспечивается,главным образом , ферментами антиоксидазной
системы,ключевым компонентом которой является супероксиддисмутаза
(СОД). Ранее нами была изучена СОД в процессе роста каллусной ткани
раувольфии змеиной. В данной работе исследовали активность и
некоторые физико-химические свойства СОД в процессе роста культуры
ткани женьшеня. Динамику уровня активности СОД определяли в
течение 30 суток культивирования клеток через каждые 4-5 дней.
Установлено наличие двух максимумов активности фермента на 20-е и
35-е сутки роста, что совпадало с митотической активностью клеток
женьшеня. В клетках культуры различного возраста выявлены 2
молекулярные формы фермента. На ранних этапах развития ткани и
п о с л е 3 0 -х с у т о к ро с та обе и зоф о рм ы им е ли о д и н а ко в ую
электрофоретическую подвижность (Rf1 =0,28, Rf2=0,77), однако на 20-
е сутки наблюдали исчезновение изоформы 1 и появление изоформы 3
фермента (Rf3=0,94). Выделение и очистку СОД проводили при помощи
гельфильтрации на сефадексе G-75 и аффинной хроматографии на
аминодиацетат-целлюлозе. В результате был получен высокоочищенный
фермент, гомогенный при электрофорезе в 10% DS-Na ПААГ и изучены
некоторые физико-химические свойства СОД (оптимум рН=7,8; оптимум
температуры = 20-24 С). Рассчитанная молекулярная масса нативной
СОД равнялась 27,5-30 кДа. При электрофорезе в 10% DS-Na ПААГ
было установлено, что фермент является димером, протомеры имели
молекулярную массу 16-17 кДа.
23
Научн я электронная библиотека ЦНСХБ