ЭлБиб

337

вировании на искусственных питательных средах), однако ак-

тивными в процессах рубцовой ферментации [4].

В связи с этим, актуальным является поиск новых, более

простых и точных методов для качественного и количествен-

ного изучения микрофлоры рубца жвачных. Одним из наибо-

лее перспективных на сегодняшний день является T–RFLP

(Terminal restriction fragment length polymorphism) — молеку-

лярно-биологический метод для изучения структуры микроб-

ной экосистемы. Анализ включает стадии выделения ДНК из

исследуемых образцов, амплификацию генов 16S/18S

рРНК/рДНК, обработку эндонуклеазами рестрикции и разде-

ление фрагментов генома на секвенаторе. В результате иссле-

дования получается T–RFLP-грамма — график с пиками, на

котором каждый пик отражает микроорганизм, а площадь пика

является долей данного микроорганизма в микробном сообще-

стве. Данный метод позволяет оценить состояние микрофлоры

в ЖКТ животных и определить патогенные микроорганизмы

(включая некультивируемые виды) [5].

Целесообразность применения этого метода для изучения

микрофлоры рубца доказана многочисленными исследования-

ми ученых США и ЕС [6]. В США созданы базы данных для

идентификации бактерий по длине фрагментов ДНК (Fragment

Sorter и др.).

Целью данного исследования было изучение структуры

бактериальных сообществ рубца коров с разным уровнем со-

стояния здоровья, молочной продуктивности и с различными

рационами в хозяйствах Ленинградской области.

Материалы и методы.

Содержимое для анализа микро-

флоры отбирали с помощью зонда из рубца здоровых коров

(ЗАО «Племзавод «Большевик»), а также непосредственно из

рубца коров, выбракованных по бесплодию, хромоте и сниже-

нию удоев (сразу после убоя) (ЗАО «Племзавод «Большевик»,

«Племзавод «Раздолье», ЗАО «Племзавод «Приневское», СПК

«Кобраловский»). Рационы животных при этом различались по

количеству концентратов и грубых кормов (табл. 1).

лек

онная Научная СельскоХозяйственная Библиотека