ЭлБиб

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Рис

. 1.

Электрофореграмма продуктов ПЦР образцов клевера лугового

с праймером

RCS1307

М — молекулярный маркер; лунки с 1 по 9 — образцы клевера лугового из Чили,

Южной Африки, Новой Зеландии, Бурятии, Магадана, Уругвая; Белоцветковый;

дикорос Беларусь, дикорос Смоленский. Лунка 10 — контроль (вода)

Специфичные ампликоны получены также для образцов из Юж-

ной Африки, Новой Зеландии и Белоцветкового с праймером

RCS1640

(150 нуклеотидных пар).

С праймером

RCS

4280 получены отчетливые монолокусные

фрагменты амплификации размером 120 пар оснований, однако поли-

морфизм между исследуемыми образцами не выявлен. Остальные

праймеры оказались недостаточно информативны на исследуемом ма-

териале (не прошла амплификация большей части образцов или ПЦР

продукты были слабовыраженными, нечеткими).

Заключение.

Результаты исследований показали, что применяе-

мая методика выделения ДНК с использованием коммерческого набора

реагентов «ДНК

Экстран

4» обеспечивает получение образцов ДНК

в количестве и качестве, необходимым для проведения

SSR-

анализа.

Испытанные микросателлитные маркеры оказались, в основном,

монолокусными и генерировали ПЦР

продукты в диапазоне 120–

250

пар оснований, характерные для всех экспериментальных образцов.

Определены два информативных праймера (

RCS

1307 и

RCS

1640), вы-

являющие полиморфные фрагменты для образцов клевера лугового из

Чили, Бурятии, Южной Африки, Новой Зеландии и Белоцветкового.

Следовательно, эти праймеры и применяемую технику анализа можно

использовать для сортовой идентификации клевера лугового. Однако,

учитывая, что всего 28 % праймеров оказались информативными от об-

щего количества, необходимо увеличивать их выборку для использова-

ния в ПЦР

анализе. Это является одним из важнейших условий успеш-

ной оценки генетических вариаций в популяциях, сортах и сортообраз-

цах изучаемой культуры.

Специфичный

фрагмент ДНК

Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека