ЭлБиб

37 / 60

При существующей значительной доле импорта мяса и
мясопродуктов на отечественном рынке сохраняется на
стороженность в отношении пищевых токсикоинфекций. Ста
тистика, приведенная ВОЗ, регистрирует значительное увели
чениевЕвропезаболеваний,обусловленныхпотреблениемпро
дуктов питания, контаминированных патогенными микроорга
низмами. Один из возбудителей пищевых токсикоинфекций –
сальмонелла, которая является причиной 77% случаев всех
вспышек заболеваний пищевого происхождения.
Сальмонеллы представляют собой один из 12 родов боль
шогосемействабактерийEnterobacteriacae. Поморфологичес
ким и культуральным характеристикам, а также токсино обра
зованиюбольшинство видовмногочисленного рода Salmonella
не отличаются друг от друга. В основе их классификации ле
жит строение соматического О антигена и флагеллярных бел
ков (жгутикового Н антигена). На основании различий в стро
ении соматического О антигена их делят на серологические
группы А, В, С, D, Е и т.д. По особенностям жгутикового Н ан
тигена внутри каждой группы выделяются различные серова
рианты. По серологической типизации систематизировано
более 2200 серотипов сальмонелл.
Длительность выявления сальмонелл из пищевых про
дуктов при использовании классических методов согласно
ГОСТу составляет пять суток.
Таким образом, становится очевидной необходимость со
вершенствования микробиологических методов ветеринар
но санитарной экспертизы с целью обеспечения безопас
ности пищевых продуктов, что требует использования вы
сокоэффективных методов качественного определения бак
терий рода Salmonella. Одна из возможностей быстрого вы
явления сальмонелл в пищевых продуктах – применение
фермент связанного флуоресцентного анализа с помощью
тестов VIDAS SLM(Salmonella) на приборе miniVIDAS. Прин
цип его действия основан на взаимодействии комплекса вы
сокоспецифичных моноклональных антител и антигенов О и
Н. В состав набора для определения сальмонелл входят 60
стрипов, стандарт SLM, положительный контроль SLM (очи
щенный инактивированный антиген Salmonella), отрицатель
ный контроль SLM, 60 наконечников SLM. На внутреннюю по
верхность последних нанесены моноклональные антитела к
Salmonella.
Согласно санитарно эпидемиологическим правилам и нор
мативам (СанПиН 2.3.2.1078 01) сальмонеллы не допускаются
в 25 г продукта. Как и при классическом методе исследования,
так иприбыстрыхметодах выявленияSalmonella пробыизмель
чаются и культивируются в одной из селективных сред, однако
продукция, при изготовлении которой применяют тепловую об
работку, перед посевом в селективную среду культивируется в
забуференной пептонной воде. После 24 48 ч инкубации при
температуре (37 ± 1) °С отбирают из селективной питательной
среды 500 мл инактивированного нагреванием образца и вно
сят в первую лунку индивидуального пластикового стрипа. Дан
ный метод определения сальмонелл не требует внесения в ка
честве антигена заведомо чистой культуры. Убедившись, что
маркировка на наконечниках и стрипах совпадает, их помеща
ют в анализатор. Все дальнейшие этапы анализа выполняются
прибором автоматически. Образец перемешивается наконеч
ником и антигены Salmonella, присутствующие в образце, свя
зываются с антителами, нанесенными на внутреннюю поверх
ность наконечника. В лунках стрипа отмываются несвязанные
компоненты, а на этапе определения – гидролиз субстрата до
флуоресцирующего продукта (4 метил умбелиферона), флуо
ресценция которого измеряется при 450 нм. На конечном эта
пе прибор автоматически анализирует полученные значения,
сравнивает их с внутренними контрольными и интерпретирует
результат какотрицательныйилиположительный. Результат вы
водится на принтер. Продолжительность анализа составляет
около 45 мин.
Благодаря быстроте метода, результаты исследований
пищевых продуктов на сальмонеллы могут быть выданы че
рез 24 48 ч.
Несомненное достоинство методики – фермент зависи
мый флюоресцентный анализ, обеспечивающий высокую
чувствительность. Все реактивы, необходимые для анализа
в нужном количестве, концентрации и молярности, находят
ся в герметически закрытых лунках стрипа. Нет необходи
мости приобретать дополнительные реактивы. Оригиналь
ная конструкция анализатора исключает риск контаминации
и упрощает его обслуживание.
Нами были исследованы на анализаторе miniVIDAS шесть
культур микроорганизмов, по морфологическим признакам
соответствующих бактериям рода Salmonella, из которых толь
ко четыре штамма дали положительный результат. С помощью
реакции агглютинации была проведена типизация выделенных
сальмонелл, в результате которой были идентифицированы:
S.typhimurium, S.еnteritidis, S.dublin и S.anatum.
Таким образом, в ходе работы с исследуемым материа
лом все положительные случаи выявления сальмонелл на
автоматическом анализаторе miniVIDAS подтверждались
классическими микробиологическими методами.
Представленный метод позволяет ускорить выявление
возбудителя пищевой токсикоинфекции и в исследуемой
продукции и, следовательно дает возможность приостано
вить или не допустить реализацию опасной для здоровья
человека продукции. Метод может быть рекомендован для
применения при ветеринарно санитарной экспертизе.
для определения сальмонелл
НЕЧАЕВ А.Ю., канд. вет. наук, докторант
Санкт Петербургская государственная академия
ветеринарной медицины
БАТАЕВА Д.С., кан. техн. наук
ВНИИ мясной промышленности
Применение автоматического
анализатора mini VIDAS
Сальмонеллезная пищевая токсикоинфекция относится к наиболее опасным и распространённым. Основной путь
заражения алиментарный. Факторами передачи инфекции являются различные продукты питания (мясо и мясные
продукты, молоко и молочные продукты, рыба, яйца, овощи, фрукты и т.д.), изготовленные с нарушением режимов
тепловой обработки или обсеменённые сальмонеллами на этапе производства. Сальмонеллы способны не только
выживать, но и размножаться в мясе и мясопродуктах, не изменяя их органолептических свойств.
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотека