передается от родителей-реконвалесцентов. Вирус накапливается
в помете, который и является источником заражения чувстви
тельных птиц. В настоящее время ИЭП встречается на всех кон
тинентах земного шара в странах с развитым промышленным
птицеводством. Экономический ущерб, наносимый этой инфекци
ей, включает убытки от падежа птицы, снижения продуктивно
сти, уменьшения выводимости цыплят и затрат на профилактику
и ликвидацию болезни.
На сегодняшний день для специфической профилактики ис
пользуют живые и инактивированные вакцины импортного про
изводства. Целью настоящей работы является определение оп
тимальных условий изготовления сухой вакцины из ранее подоб
ранного вакцинного штамма Calnek-1143 вируса ИЭП, прошед
шего шесть пассажей на СПФ-эмбрионах кур. В качестве вирус
ного материала использовали гомогенат тканей СПФ-эмбрионов,
инфицированных в дозе 100 ЭИД
5
о /мл и инкубированных 10 сут.
при +37°С. С помощью коллоидной мельницы на 0,05М фосфат
но-буферном растворе (ФБР), pH 7,6, с добавлением 1,0% хло
роформа готовили мелкодисперсный гомогенат тканей, который
освобождали от балласта центрифугированием на низкоскорост
ной центрифуге. Вирусный материал титровали на СПФ-эмбрио
нах кур. Для этого готовили десятикратные разведения из лио-
филизированной вакцины ( l 0 - l _10-7). Каждым разведением за
ражали по 4 эмбриона в желточный мешок в объеме 0,2 мл. Ос
тавляли незараженными 10 эмбрионов. Эмбрионы инкубировали
в течение 10 сут. при +37°С и относительной влажности 60 -
70%. Ежедневно проводили овоскопию эмбрионов. Эмбрионы,
погибшие в течение 72 ч, после заражения относили к неспеци
фической гибели. Гибель эмбрионов в последующие дни связы
вали с действием вакцинного вируса, полученного из них, при
условии стерильности материала (рост бактериальной и грибко
вой микрофлоры должен отсутствовать). Через 10-12 сут. эм
брионы охлаждали и вскрывали. При определении титра учиты
вали изменения эмбрионов, характерные для ИЭП (отставание в
росте, «карликовость», скрюченность, атрофия мышц конечно
стей, кровоизлияния в головном мозге). Титр вируса рассчиты
вали по методу Кербера в модификации Ашмарина. Установлено,
что материал с исходной активностью 5,5-6,0 ^ЭИД
5
о /мл и вы
ше может быть использован для приготовления вакцины.
Для проверки на безвредность содержимое трех флаконов с
57
Научная электронная б блиотека ЦНСХБ