64 / 604
няли антивидовой пероксидазный конъюгат (Sigma) и субстрат
ную смесь с о-фенилендиамином. Для разведения сывороток ис
пользовали фосфатный буферный раствор с твином-20 (0) и та
кой же раствор, но содержащий смесь антигенов пастерелл (Р).
После разведения сыворотки выдерживали 40 мин в термостате,
а затем наносили на панели. Реакцию учитывали на спектрофо
тометре АИФ-340 при 492 нм. Интерпретацию результатов про
водили только по результатам постановки на одной панели или в
одном опыте.
Реакцию оценивали по превышению оптической плотности
(ОП) в сравнении с отрицательной контрольной сывороткой
(ОКС) и по снижению ОП в растворе Р, содержащем антигены
пастрелл (в%).
Таблица 1. Результаты исследования сыворотки невакцини-
рованных и двукратно вакцинированных кур в ИФА на панелях
Sarstedt
Возраст, в
днях
Число вакцина
ций и срок после
них
Превышение ОП
в растворе 0 в
сравнении с ОКС
% снижения
ОП
в растворе Р
45
не вакцинирован
ные
3,67±0,09*
9,O il.82 *
86
не вакцинирован
ные
3,86±0,11*
13.2il.48*
97
не вакцинирован
ные
4.04±0,06*
48,3i3.34
154 не вакцинирован
ные
4,12±0,06*
26 .li3 .62 *
М±м
3,92±0,08*
24.2i2.57*
105
2 вакц., ЗОдней 10,34i0,06*
40.7i0.61*
* Различия статистически достоверны.
Из данных, приведенных в табл. 1, видно, что содержание
антител к Pasteurella multocida в сыворотках невакцинированных
птиц достаточно высока и имеет тенденцию увеличиваться с возрас
том. Соответственно возрастает и способность антител связывать
антигены, что свидетельствует о росте их аффинности.
Двукратная вакцинация кур достоверно (примерно в 2,6
раза) увеличивает концентрацию антител и их способность свя
зывать антигены пастерелл (в 1,7 раза).
62
Научная элект онная библиотека ЦНСХБ