ЭлБиб

Первичный скрининг химиопрепаратов проводили по обще

принятой методике в культуре КМС, выращенной в чашках Кар

реля, которую заражали вирусом АЧС в дозе 100-300 ГАЕ

5 0 / на чашку (множественность 0,0001-0,0003 ГАЕ 50/кл.). Че

рез 1 час контакта при 37°С в инфицированную культуру вноси

ли испытуемые дозы препаратов (обычно от 200 до 10 мкг/мл).

Эффективность а / в действия препаратов оценивали по степени

ингибирования вируса АЧС в опытной культуре клеток, по срав

нению с контрольной, путём титрования вируса в культуре КМС.

Реакцию прямой иммунофлуоресценции для выявления специ

фических антигенов вируса АЧС ставили согласно ГОСТ-28573

(Методы лабораторной диагностики АЧС).

Отработку способа оценки a / в действия химических соеди

нений иммунофлуоресцентным методом проводили с 13 препара

тами, которые были распределены по степени ингибирующей ак

тивности вируса на 4 группы. К первой группе относились со

единения, снижающие титр вируса АЧС в культуре КМС менее

чем на 2,0 lg ГАЕ 50 /мл (мидантан, С-31, С-30, Т-18), второй -

от 2,0 до 3,5 (С-15, С-15 а, ШВС-136, Т-25), третьей - от 3,5 до

6,0 lg ГАЕ 50 /мл (арбидол, РБ-тиом, Т-26, СЛ-2). К 4-й группе

была отнесена фосфонуксусная кислота (ФУК), которая полно

стью ингибировала размножение вируса АЧС.

Было установлено, что в контрольных культурах клеток ви-

рус-специфический антиген МФА выявлялся через 48 часов,

максимальное его накопление отмечалось через 96 часов (4 кре

ста). Количество антиген-содержащих клеток в эти сроки соста

вляло через 48 часов - 6,5%, 72 часа - 20,7% и через 96 ча

сов - 34,6%.

При изучении этим методом a/ в активности соединений

первой группы установлено, что они существенно не снижали

количество антигенсодержащих клеток в опытных препаратах по

сравнению с контролем. В присутствии соединений 2-й группы

вирусспецифический антиген обнаруживался в культуре КМС

лишь через 72 часа, и его количество увеличивалось к 96 часам.

Количество клеток с вирусным антигеном было примерно в 2 -

2,5 раза меньше, чем в контрольных. При использовании препа

ратов 3-й группы не было корреляции результатов выявления

антигенсодержащих клеток ИФМ и методом гемадсорбции. В ча

стности, здесь имело место наличие антигенсодержащих клеток

через 72 часа, тогда как гемадсорбция в культуре КМС отсутст

Научная электронная библиотека ЦНСХБ