

К О Л Л Е КЦ И И К У Л Ь Т У Р К Л Е Т О К И ТКА Н Е Й РАС ТЕНИЙ ; М Е Т О Д Ы СОХРАН ЕНИЯ
______ ________________________________ ГЕ Н О Ф О Н Д А __________________________________ ______
КРИОКОНСЕРВАЦИЯМЕРИСТЕММАЛИНЫ
(RUBUS IDAEUSL .)
Высоцкая О.Н., Мохаммед А.И., Бутенко Р.Г.
Институт физиологии растений РАН
Депонирование растений
in vitro,
основанное на периодической
смене питательной среды, широко применяется для поддержания
о зд о р о в л е н ны х
клонов
ве гетативно
р а зм нож аемы х
сельскохозяйственных культур. Долговременная криоконсервация
растительно го материала исключающая периодическую смену
питательной среды помогает частично сократить трудовые затраты.
Результаты экспериментов показали, что холодное закаливание (4-
8 °С,темнота) материнских растений на агаровой среде (5-6% сахаров и
цитокинины) способствовало удачной криоконсервации изолированных
апексов (0,5-2,0 мм). Экспланты, изолированные из закаленных
in vitro
растеньиц, были предкультивированы на жидкой среде с 5-7%
диметилсульфоксид о м при 18-22 °С в течение 18 часов. Затем они были
перенесены в холодную смесь криопротекторов (5-6% сахаров, 7-9%
диметилсульфоксида в криопробирках Nunc) и заморожены быстро или
медленно с погружением, в конце, в жидкий азот (-196 °С). Через 1 час
или более длительное время образцы были извлечены из жидкого азота
и оттаяны в водяной бане (40 °С).
После криоконсервации жизнеспособные меристемы малины (сорта:
Скромница, Ласточка, Польша) регенерировали (10-86 %) минуя стадию
каллуса . После такой обработки они давали многочисленной
жизнеспособное потомство на питательной среде, содержащей
цитокинин.
519
Научная электронная библиотека ЦНСХБ