ЭлБиб

М ОЛ ЕКУЛЯ РНО -БИОЛО ГИЧЕСКИ Е О СО БЕННО С ТИ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ

РА С ТИ Т ЕЛ ЬНЫ Х КЛЕТОК IN V ITRO

СИНТЕЗБЕЛКОВИЗРАЗЛИЧНЫХ14-СУБСТРАТОВВКЛЕТКАХ

КАЛЛУСНОЙИСУСПЕНЗИОННОЙКУЛЬТУР

Белова Л.П., Ильина Т.М,

Казанский институт биологии КНЦРАН Казань, 420503, а /я 30

Исследовано поступление метки из 14с-бикарбоната и 14С-

гидролизата белка или 14с-аланина в белки различных (по растворимости)

фракций, а также в белки, имеющие различную компартментацию -

цитоплазма и клеточная стенка.

Опыты проводили на молодой, интенсивно растущей каллусной

ткани табака и миксотрофной суспензионной культуре сои (середина

фазы экспоненциального роста). Белки щелочерастворимой и

цитоплазматической фракций отделяли от других меченых соединений

осаждением ТХУ (до конечной концентрации 7%). С этой же целью для

белков водосолерастворимой и цитоплазматической фракций проводили

диализ, используя диализные трубки не пропускающие молекулы

крупнее 6-8 кД. Из клеточных стенок белки экстрагировали 3 М LiCI в 10

мМ натрий-фосфатно-цитратном буфере (pH 5,5) при 4 °С в течении 48

часов.

Обнаружено неодинаковое использование меченого углерода

экзогенных аминокислот и бикарбоната на синтез отдельных фракций

белков - водосолерастворимых и щелочерастворимых, а также на синтез

белков, имеющих различную компартментацию в клетке, - клеточной

стенки и цитоплазмы. После 40-минутной экспозиции клеток с мечеными

субстратами отмечено относительно большее включение меченого

углерода из бикарбоната в водосолерастворимые белки и белки

цитоплазмы, по сравнению с вариантом, где в качестве субстрата

использовались экзогенные меченые аминокислоты. Последние

предпочтительнее использовались при биосинтезе белков клеточных

стенок. Степень различий скоростей обновления белков цитоплазмы и

клеточных стенок была неодинаковой в этих двух вариантах - более

значи тельное превышение удельной радиоактивности белков

цитоплазмы над таковой для белков клеточных стенок в варианте с 14С-

бикарбонатом, по сравнению с другим вариантом - с 14с-гидролизатом

белка.

Природа выявленных закономерностей обсуждается в рамках

предположения, что в синтезе белков клеточных стенок участвует

пространственно изолированный фонд или подфонд аминокислот,

который имеет тесную метаболическую связь с транспортным потоком

аминокислот извне.

3 3 5

Научная эл ктронная библиотека ЦНСХБ