ЭлБиб

280 / 592

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ, СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ
ЭКСПРЕССИЯГЕНАИНТЕРЛЕЙКИНА-1ВЧЕЛОВЕКА В
ТРАНСГЕННОЙКУЛЬТУРЕБОРОДАТОГОКОРНЯХРЕНА
( A R M O R C E A E RUSTICANA)
Ляпкова Н.С., Шаденков А.А., Майсурян А.Н., Ковалева М.В.,
Шемякин М.Ф.
ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН, 127550, Москва ,
ул. Тимирязевская, д.42 E-Mail:
Интерлейкин-1 β человека относится к цитокинам - универсальным
белкам иммунного ответа. Известно, что в крови человека IL-1p
экскретируется во внеклеточное пространство. Активация белка
происходит снаружи клеточной мембраны с помощью специфической
протеиназы, другие функции которой пока не установлены. В данной
работе проведено исследование экспрессии гена IL-1 β в клетках
трансгенной культуры бородатого корня хрена. Разработана система
культивирования бородатого корня в жидкой среде, удобная для анализа
экскреции белковых продуктов растения во внеклеточное пространство
и наработки их в препаративных количествах. Сконструированный ген,
в котором последовательность 1L-1β находится под контролем
растительного 35S-промотора, введен в состав бинарного вектора. С
помощью трансформации Agrobacterium tumefaciens, содержащими этот
ген, получен трансгенный хрен с геном IL-1β. Вторичная трансформация
трансгенных растений штаммом A. rhizogenesА4 позволила получить
культуру бородатого корня, экспрессирующую IL-1 β . Данные
иммуноблоттинга указывают на то, что продукт гена IL-1 β представляет
собой 31 кДа белок, что соответствует размеру проинтерлейкина.
Очевидно, в высших растениях отсутствует протеиназа, специфичная к
полноразмерному продукту гена IL-1β. С помощью иммуноферментного
анализа определяется уровень накопления IL-1β в средах, на которых
культивируется бородатый корень.
Работа выполнена при поддержке Российского фонда
фундаментальных исследований.
280
Научная электронная библиотека ЦНСХБ