ЭлБиб

ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ РАСТЕНИЙ. СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ

ГЛИКОЗИДАЗНАЯ И РИБОНУКЛЕАЗНАЯАКТИВНОСТИ В

КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРАХЖЕНЬШЕНЯ,ТРАНСФОРМИРОВАННЫХ

АГРОБАКТЕРИАЛЬНЫМ ОНКОГЕНОМ rolC

Булгаков В.П., Федореева Л .И., Яснецкая Е.Г., ЖуравлевЮ.Н.

Биолого-почвенный институтДальневосточного отделения РАН, 690022,

Владивосток, Россия Тихоокеанский институт биоорганической химии, ДВО РАН

Р и б о н у к л е а зн а я

а кти вн о с ть и зучена при

помощи

спек торофотометрического метода в клеточной культуре женьшеня

(ш там м 1с) и п р о и зв о д ны х от этого ш тамма кул ь тур а х ,

трансформированных вектором pPCV002, содержащим ген

rolC.

Установлено, что во всех полученных культурах трансгенных 1с

-rolC

корней рибонуклеазная активность повышена в 1,5- 3,5 раза по

сравнению с исходной культурой 1с (1600-3500 и 1000-1100 Ед/г сырой

массы для 1с

rolC

1с культур). Поскольку ген

rolС

кодирует гликозидазу

цитокининов (Estruch e tal., 1991), в полученных культурах изучена также

гликозидазная активность. Она составила 28-39 Ед/г сырой ткани для

культуры 1с и 55-98 Ед/г для 1c

-rolC

корней. Обнаружена высокая степень

корр ел яци и (г=0 .9147 ) между повыш ением гли ко зида зной и

рибонуклеазной активностью в культурах трансгенных корней. Это может

свидетельствовать о том, что продукт гена

rolC

обладает одновременно

этими двумя видами активности. Белок массой около 23 кДа,

соответствующий по массе продукту гена гоlС (Estruch et al., 1991),

идентифицирован на ДСН ПАГ электрофореграммах экстрактов из

трансгенных корней. Этот белок расщепляет как фенольный субстрат

(п н и тр оф е н и л -b- D -глю ко п и р а н о зи д ), та к и дрож ж е в ую РНК.

Последующая работа будет направлена на выделение белка и изучение

его специфической активности.

2 4 8

Научная электронная библиотека ЦНСХБ