194 / 592
ОСОБЕННОСТИ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК РАСТЕНИЙ ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
ДЕСТРУКЦИЯГЕНОМАЛАНДЫШАПРИДЛИТЕЛЬНОМ
КУЛЬТИВИРОВАНИИ
АверьяноваВ.А., *АлександроваИ.В., КлицовС.В.
ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН, 127550Москва,
Тимирязевская, 42.
*Московская медицинская академия им.И.М.Сеченова, 119435 Москва,
Б.Пироговская, 2-6.
Каллус ландыша, полученный из центральной жилки листа,
культивировали на модифицированной среде
МС.
Для контроля
изменчивости генома вели цитогенетический анализ с экспланта до 7-
го пассажа методом временных давленых препаратов митотических
х р ом о с ом .
В первы е
со с та вл е н
карио тип
ландыш а :
K=2n=38=2(13m+5sm+1ast), длина генома 247,7+7,4мкм, 7-ая пара -
спутничные хромосомы, вторичная перетяжка отделяет линейный
спутник. При сравнении данного стандартного генома ландыша майского
с геномом длительно культивируемых каллусных клеток установлено:
1) в культуре резко возрастает доля анеуплоидных клеток, модальный
класс составляют клетки с числом хромосом 64-86 при варьировании
2п=32-86 хромосом. Хромосомы сверхспирализованы, центромера не
локализуется. 2)
in vitro
при увеличении 2п в 2,7 раза, размер генома
увеличивается только в 2 раза; 3) размер генома культивируемых клеток
64+3,4мкм; 4) по сравнению с эксплантом, в культивируемых клетках
происходит значительная деструкция генома: его размер сокращается
в 4 раза. Поскольку ландыш , как большинство однодольных,
характеризуется значительным размером генома и малым соотношением
уникальных последовательностей ДНК к часто повторяющимся, такая
деструкция генома должна приводить к смене основного типа
изменчивости, свойственного однодольным в природе (амплификация,
полиплоидия), на изменчивость, характерную для двудольных (генные
мутации). Именно этим можно объяснить малый прирост биомассы и
значительное падение продуктивности культуры по вторичным
метаболитам. Так, содержание важнейших гликозидов - конваллозида
и конваллотоксина падает в каллусной культуре до 0,05% сухого веса.
194
Научная электронная библиотека ЦНСХБ