15
4
•
2007
ПИВО
и
НАПИТКИ
ТЕХНОЛОГИЯ
активным биологическим компонентом,
коррелирует с суммарным содержани-
ем липидов, достигая приблизительно
80% их общего количества. Известно,
что аминокислоты в клетках микроорга-
низмов влияют на биосинтез веществ не-
белковой природы, в частности липидов.
Изученный ранее аминокислотный состав
штамма
Saccharomyces cerevisiae Y-503
подтверждает разницу в количественном
соотношении аминокислот в исследуемых
вариантах. Взаимосвязь между липидным
обменом и такими макроэлементами,
как калий и натрий, играющими важную
роль в метаболизме дрожжевой клетки
и участвующими в транспорте веществ
через клеточную мембрану, также хоро-
шо известна. В биомассе опытного вари-
анта их количество, изученное ранее [7],
значительно отличается от аналогичных
показателей в контроле. Изменение со-
держания в клетке общих липидов и фос-
фолипидов могло повлиять на клеточную
проницаемость и работу калий-натриево-
го насоса, что, в свою очередь, говорит
о степени активности взаимосвязи клет-
ки с опытной питательной средой. Изме-
нение фосфолипидного состава мембран
и, как следствие, их физико-химических
свойств, может выступать в качестве
фактора, регулирующего активность фер-
ментов [8], что объясняется изменением
взаимодействия ферментов с фосфоли-
пидным окружением. В связи с этим боль-
шой интерес представляет исследование
активности ферментов, участвующих
в углеводном и азотистом обмене: алко-
гольдегидрогеназы (1.1.1.1),
α
-глюкози-
дазы (3.2.1.20),
β
-фруктофуранозидазы
(3.2.1.26), глюкоамилазы (3.2.1.3), сум-
марного количества протеиназ (3.4).
Так как
β
-фруктофуранозидаза катали-
зирует реакцию гидролиза сахарозы, вхо-
дящей в состав мелассной питательной
среды, активность фермента проявляет-
ся с самого начала процесса брожения.
Показано, что уровень его активности
в опытном варианте дрожжей превос-
ходит контроль в 1,17 раза в суспензиях
клеток и в 1,24 раза в бесклеточных экс-
трактах (табл. 2). Образование мальтозы
в анаэробной среде, основным компонен-
том которой является мука, способствует
синтезу
α
-глюкозидазы. В наших экспе-
риментах дрожжи, выращенные на пи-
тательной среде с геотермальной водой,
имеют более высокий уровень активности
α
-глюкозидазы: в 1,14 раза в суспензиях
клеток и в 1,4 раза — в бесклеточных
экстрактах по сравнению с дрожжами,
выращенными на контрольной пита-
тельной среде. Реакция восстановления
ацетальдегида до этанола катализирует-
ся ферментом алкогольдегидрогеназой,
что имеет важное значение для процесса
созревания теста. Установлено, что ак-
тивность алкогольдегидрогеназы опыт-
ного варианта превосходит контроль
в 1,54 раза в суспензиях клеток и в 1,21
раза в бесклеточных экстрактах. Условия
культивирования и состав питательной
среды повлияли и на способность клеток
синтезировать глюкоамилазу (амило-
глюкозидаза), которая также принимает
участие в углеводном обмене дрожжей.
Глюкоамилаза — единственная из всех
амилаз, способная быстро расщеплять
крахмал муки до легкосбраживаемого
субстрата — глюкозы. Установлено,
что уровень активности глюкоамилазы
в суспензиях клеток опытного варианта
выше в 1,45 раза по сравнению со штам-
мом, выращенным на контрольной среде.
По-видимому, данный индуцибельный
фермент синтезируется в результате воз-
действия биологически активных веществ
геотермальной воды, повлиявших на из-
ученный ранее аминокислотный состав
опытного штамма, а большее содержание
аргинина, глутаминовой кислоты и про-
лина в клетке, как известно, стимулирует
накопление глюкоамилазы в дрожжах.
Особое место среди гидролаз дрож-
жей по своей роли во внутриклеточных
процессах занимают протеолитические
ферменты, как известно, не только вы-
полняющие в организме деструктив-
ную функцию, но и играющие важную
регуляторную роль. Как показали ис-
следования, штамм
S. cerevisiae Y-503
,
выращенный на питательной среде с гео-
термальной водой, по уровню суммарной
протеолитической активности превыша-
ет такие же показатели штамма, культи-
вируемого на контрольной среде: в 2,7
раза в суспензиях клеток и в 1,5 раза
в бесклеточных экстрактах. Возможно,
это связано с большей интенсивностью
азотистого обмена. Известно, что опре-
деленные металлы оказывают влияние
на специфичность действия и величину
удельной активности протеолитических
ферментов. В нашем эксперименте по-
вышению активности протеолитических
ферментов способствовали изученные
ранее, находящиеся в геотермальной
воде и востребованные дрожжевыми
клетками макро- и микроэлементы маг-
ний, марганец, кобальт, цинк.
Таким образом, процесс адаптации
культуры к минеральным и органическим
компонентам геотермальной воды в соста-
ве среды культивирования затрагивает
различные стороны метаболизма дрож-
жей
S. cerevisiae Y-503
. При этом отмеча-
ются значительные изменения в процес-
сах фосфорного, азотистого, углеводного,
липидного обмена дрожжей.
ЛИТЕРАТУРА
1.
АбрамовШ.А., Котенко С.Ц., ЭфендиеваД.А., Ха-
лилова Э.А., Исламмагомедова Э.А., Даунова С.М.
Новая питательная среда для выращивания
дрожжей//Прикладная биохимия и микро-
биология. 1995. Т. 31. №2. С. 232–233.
2.
Котенко С. Ц., Исламмагомедова Э. А.
Влия-
ние питательной среды на ферментативную
активность штамма Saccharomyces oviformis
Y-2635//Хранение и переработка сельхозсы-
рья. 2005. №4. С. 37–38.
3.
Новаковская С.С., ШишацкийЮ.И.
Роль хими-
ческих элементов в биосинтезе. Производство
хлебопекарных дрожжей. Справочник. — М.:
Агропромиздат, 1990.
4.
Стрелков В.М., Гайлитис Ю.П., Шмит У.Я.,
Романов Н.А., Юркевич Д.В., Ведерников Н.А.
Стимулирующее влияние продуктов механо-
химической деструкции гуминовых веществ
торфа на рост кормовых дрожжей//Биологи-
ческие науки. 1991. №10. С. 83.
5.
Овчинникова Т. Ф., Кудряшов А. П., Ма-
жуль В.М., Наумова Г.В., Райцина Г.И.
О мем-
бранной активности гидрогумата — гуминово-
го препарата из торфа//Биологические науки.
1991. №10. С. 106.
6.
Исламмагомедова Э.А., Исламова Ф.И.
О не-
которых физиолого-биохимических свойствах
дрожжей рода Saccharomyces в зависимости
от состава питательной среды//Вестник ДНЦ
РАН. 2001. №9. С. 66–68.
7.
Исламова Ф.И.
Морфофизиологические и био-
технологические особенности дрожжей рода
Saccharomyces в зависимости от состава пита-
тельной среды//Автореф. дис…—Махачкала.
2002.
8.
Wu Wen. I, Carman G.M.
Regylation of phosphati-
date phosphatase activity from the yeast Saccharo-
myces cerevisiae by phospholipids//Biochemistry.
1996. V.35. N. 12. P. 3790–3796.
9.
Колтукова Н.В., Менджул М.И., Лысенко Т.Г.,
Перепелица С.И.
Выделение, очистка и харак-
теристика протеиназ Plectonema boryanu-
m//Прикладная биохимия и микробиология.
1993. Т. 29. №4. С. 519.
Фермент
α
-Глюкозидаза, Е/мг
β
-Фруктофуранозидаза, Е/мг Алкогольдегидрогеназа, Е/мг Глюкоамилаза, Е/мг Суммарная протеиназа, Е/мг
Объект исследования
Суспензия
клеток
Бесклеточный
экстракт
Суспензия
клеток
Бесклеточный
экстракт
Суспензия
клеток
Бесклеточный
экстракт
Суспензия
клеток
Суспензия
клеток
Бесклеточный
экстракт
S. cerеvisiae (опыт)
32,1±1,19 27,5±0,96 36,2±1,18 32,6±1,12 0,68±0,03 0,51±0,03
1,75±0,07
0,18±0,01 0,66±0,03
S. cerеvisiae (контроль) 28,2±1,04 20,0±0,85 30,8±1,14 26,3±1,01 0,44±0,02 0,42±0,02
1,20±0,06
0,07±0,01 044±0,02
Таблица 2
Электронная Научная СельскоХозяйственная Библиотек