ЭлБиб

Суспензионную культуру получали из хорошо пролиферирующей каллусной

ткани, полученной из сегментов черешков 14-ти дневных проростков, и выращи

вали в 100 мл колбах в 20 мл питательной среде на аппарате роллерного типа со

скоростью вращения 100 об/мин. Пересадку суспензионной культуры осуществля

ли один раз в 2 недели при этом учитывали следующие показатели: жизнеспособ

ность, плотность и агрегированностъ. Ростовой индекс (Ri) подсчитывали по от

ношению числа клеток в 1 мл в конце пассажа к числу клеток в начале пассажа.

Чистую культуру гриба Altemaria radicina выращивали на жидких пита

тельных средах Мурасига и Скуга (МС), а также Чапека. Культуральный фильтрат

(КФ) получали выращивая изолягы гриба в 300 мл колбах в 200 мл объеме пита

тельной среды на качалке со скоростью вращения 100 об/мин. Оптическую плот

ность (D) КФ определяли на 9, 14, 19, 23,30-й день с момента выращивания пато

гена в жидкой питательной среде и измеряли на фотометре КФК-2УХ 4,2.

Клеточную селекцию проводили на суспензионной культуре моркови, в при

сутствии в питательной среде КФ гриба в концентрациях 10%, 20%, 30%, 40%,

50%. Интенсивность роста суспензионной культуры в стрессовых условиях опре

деляли по ростовому индексу.

После селекции, суспензионную культуру платировали в агаризованную пи

тательную среду и получали растения-регенеранты, после чего их переносили в

пробирки на жидкую питательную среду МС ( на вату) с целью формирования

нормальной корневой системы,

культуры.

При культивировании суспензионной культуры моркови, всех изучаемых гено

типов, в нормальных условиях были обнаружены различия уже на первых этапах

культивирования. Полученные данные свидетельствуют о том, что у изучаемых

генотипов, фазы ростового цикла наступают в разное время. Были выделены ли

нии ( 225, 906, Рондо), для которых характерно одинаковое поведение клеток з

суспензионной культуре. Лаг-фаза у этих генотипов длиться 7 дней, после чего

наблюдается активное деление клеток ( линейная фаза), что проявляется в резком

251

Электронная Научная СельскоХозяйств н ая Библиотека