ванных ферментов (1,4). Целью иммобилизации является по
вышение устойчивости ферментов к денатурирующим агентам и
придание им заданных технологических свойств, в том числе
возможности повторного использования и легкости выделения
из реакционной смеси (4).
Цель нашей работы - исследовать изменение ферментатив
ной активности липаз животного и грибкового происхождения в
присутствии полиэлектролитов полистиролсульфоната натрия
(ПСС) и полидиаллилдиметиламмоний хлорида (ПАМА).
Панкреатическая липаза свиньи является гликопротеидом,
имеющим молекулярную массу порядка 50000, оптимум pH 8-9. и
оптимум температуры 40°С (1). Позиционная специфичность по
отношению к первичным эфирным связям имеется, но не во
всех случаях. Обычно этот фермент может гидролизовать также
ди- и моноглицериды (5). Данный фермент эффективно расщеп
ляет триглицериды, находящиеся в эмульгированном состоянии
(2,3). Свойство липазы специфически гидролизовать сложные
эфиры третичных спиртов широко используется для анализа и
синтеза жиров и других глицеридов (6).
В литературе очень мало данных о липазе, продуцируемой
грибом Mucor javanicus (3). Из химических свойств выделенной
липазы приводятся только данные о ингибировании липолитиче
ской активности диизопропилфторфосфатом, а цистеин и ЭДТА
не влияли на активность. Данную липазу можно отнести к группе
сериновых ферментов, однако она отличается от большинства
других липаз pH оптимумом (около 5,5). Оптимум температуры
для действия липазы равен 50°С. М„ = 40 000 г/моль, pi = 4,68.
Для изучения влияния полимерного окружения на активность
липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба
Mucorjavanicus
были взяты противоположно заряженные полиэлекгролиты: Na-
полистиролсульфонат (ПСС) с молекулярной массой 70000
г/моль использовался как полианион; полидиаллилдиметилам
моний хлорид (ПАМА) с молекулярной массой 450000 г/моль
использовался как поликатион. Измерение активности липазы
проводилось с помощью метода потенциометрического титро
вания по скорости гидролиза триацетина на автоматическом тит-
раторе «РНМ 290 pH-stat controller» (фирмы «Радиометр», Ко
пенгаген) при рН=7,0. Одна единица Активности липазы соответ
ствует 1 мкмоль уксусной кислоты, выделяющейся при фёрмен-
тативном гидролизе субстрата триацетина в одну минуту. Отно-
15
Научная электронная библиотека ЦНСХБ