гать, что изменения биохимическою характера, особенно отдельных пока
зателей крови и сыворотки крови животных, являются предопределяющи
ми для развития иммунологического ответа и, соответственно, ею функци
ональной активности.
Работа в этом направлении будет продолжена.
УДК: 619: 116-006.446:636,22/28
С.В. Чичинина
,
В.В. Хромцов
,
П.Н. Смирнов (ГНУ ИЭВС иДВ)
Е.А. Дурыманова, В.А. Белявская (ГНЦ ВБ «Вектор»)
ВОЗМОЖНОСТИ И ОГРАНИЧЕНИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР) ВДИАГНОСТИКЕ
ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГА ТОГО СКОТА (ВЛКРС)
Аннотация. Показана возможность использования серологических ме
тодов в комплексе с молекулярно-генетическими на основе ПЦР. Выявлена
дискондартность результатов в зависимости от породной и геофафической
принадлежности, что является результатом сложною'взаимодействия вне
шних факторов среды и генетической вариабельности хозяина и патогена.
Цель работы. Сравнительное изучение методов РИД и ПЦР в диагнос
тике ВЛКРС, выявление возможною несоответствия (диСкО!сдаргности) меж
ду результатами, и оценка влияния на уровень дискондаргносги породного
и геофафического факторов.
Методики исследований. Исследовали биомагериал от 268 животных
нескольких пород молочного и мясо-молочною направления (черно-пест
рая с различной долей голштинизации, красная степная, симментальская)
из различных хозяйств Новосибирскою, Карасукекого, Кочеиевского, Бара-
бинского районов Новосибирской области.
Антитела к ВЛКРС выявляли с помощью реакции иммунодифузии (РИД)
в агаровом геле согласно инструкции к применению (нр-во Курской биофаб
рики). «Nested» -ПЦР для сегмента гена env ВЛКРС проводили по методу,
описанному Licursi М. et al. (2002). Олиюнуклео тидные праймеры были по
добраны с помощью компьютерной программы Oiigo version 3.0 и синтези
рованы на автоматическом синтезаторе ASM 102 (фирма «Биосег»). ДНК
выделяли из лейкоцитов периферической крови (Т Маннатис, 1984).
Результаты исследований. Программы противолейкозиых мероприя
тий-в РФ основаны на выявлении серомозитииных животных с последую
щей их изоляцией или убоем. Серологические тесты диагностики являются
наиболее эффективными и повсеместно используемыми в оценке распро
странения инфекции вируса лейкоза в спадах крупною рогатого скота. В то
же время длительные наблюдения исследователей за животноводческими
хозяйствами, неблагополучными по лейкозу, показываю т(Махмансои В.А.,
299
Научная электронная библи тека ЦНСХБ